Phospho-Tau-T217 Rabbit mAb per WB, ELISA - P10636-8

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della Tau

• La Tau è una proteina associata ai microtubuli codificata dal gene MAPT, espressa principalmente nei neuroni dove stabilizza i microtubuli e promuove il trasporto assonale.
• Lo splicing alternativo genera sei principali isoforme di tau nel cervello umano adulto; l'isoforma Tau-F (P10636-8) è una di queste varianti, che differisce per inserti N-terminali e ripetizioni di legame ai microtubuli.
• L'iperfosforilazione della Tau porta al suo distacco dai microtubuli e all'aggregazione in filamenti elicoidali accoppiati (PHF), formando grovigli neurofibrillari—un tratto distintivo della malattia di Alzheimer e di altre tauopatie.
• Il sito di fosforilazione Thr217 è tra le modifiche patologiche precoci e prominenti, contribuendo alla disfunzione e all'aggregazione della tau nella neurodegenerazione.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è un fosfo-peptide sintetico specifico per il sito di fosforilazione T217; si consiglia il pre-assorbimento con il peptide non fosforilato per confermare la fosfo-specificità nel Western blot.
• Per il Western blot, prendere in considerazione l'uso di un anticorpo anti-tau totale come controllo di carico per verificare il caricamento uguale delle proteine e valutare i livelli di fosforilazione.
• Il peso molecolare previsto dell'isoforma Tau-F è di ~46 kDa, ma le modifiche post-traduzionali, lo splicing alternativo e l'aggregazione possono comportare bande aggiuntive; validare nei lisati cellulari o tissutali pertinenti.
• Nell'ELISA, utilizzare l'anticorpo in combinazione con un anticorpo di cattura per la tau per misurare i livelli di fosfo-T217 tau; ottimizzare le condizioni di rivestimento e di blocco per i campioni umani.
• Preparare sempre freschi i lisati con inibitori delle fosfatasi per preservare lo stato di fosforilazione; eseguire controlli positivi e negativi per validare il segnale.

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