pAb coniglio anti Phospho-Tau-T231 - P10636

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della Tau

• La Tau (proteina tau associata ai microtubuli) è codificata dal gene MAPT e esiste in diverse isoforme generate da splicing alternativo; è espressa principalmente nei neuroni. Le isoforme del sistema nervoso centrale differiscono da quella del sistema nervoso periferico (PNS-tau).
• La funzione centrale della Tau è promuovere l'assemblaggio e la stabilità dei microtubuli, un processo fondamentale per l'instaurazione e il mantenimento della polarità neuronale. Riferimenti correlati: PMID:21985311
• La Tau agisce come proteina di collegamento: lega i microtubuli assonici tramite il suo C-terminale e i componenti della membrana plasmatica neuronale tramite il suo N-terminale. Riferimenti correlati: PMID:21985311, PMID:32961270
• Subcellularmente, la Tau si trova nel citoplasma, nel citosol, è associata al citoscheletro e localizzata in assoni e dendriti. Può anche essere secreta e associarsi alla membrana cellulare.
• Le modifiche post-traduzionali della Tau includono fosforilazione, acetilazione, glicazione, metilazione e ubiquitinazione. L'iperfosforilazione in siti come T231 è un segno distintivo della malattia di Alzheimer e delle tauopatie correlate, e porta alla formazione dei filamenti elicoidali accoppiati (PHF).
• Specificità tissutale: le isoforme sono espresse in modo differenziale; le isoforme CNS si trovano nel sistema nervoso centrale, mentre la PNS-tau è espressa nel sistema nervoso periferico.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno era un peptide fosforilato sintetico intorno alla posizione T548 della Tau umana (corrispondente a T231 nell'isoforma di 441 amminoacidi comunemente studiata), quindi l'anticorpo è specifico per il sito di fosforilazione T231. Verificare la numerazione esatta nell'isoforma bersaglio del vostro esperimento.
• Per il Western blotting, utilizzare tamponi di lisi specifici per proteine fosforilate e considerare di aggiungere inibitori di fosfatasi per preservare la fosforilazione. Verificare la specificità della banda con controlli di Tau non fosforilata o tramite trattamento con fosfatasi.
• L'anticorpo mostra reattività crociata con il topo; tuttavia, è necessario convalidare il riconoscimento della Tau fosforilata in T231 nei campioni di topo, poiché i pattern di fosforilazione possono differire tra le specie.
• Per le applicazioni ELISA, l'abbinamento con un anticorpo di cattura che riconosce la Tau totale può aiutare a normalizzare i segnali di fosforilazione.

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