Anticorpo Policlonale di Coniglio Fosfo-TBC1D4-S588 per WB, ELISA - O60343

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di TBC1D4

• TBC1D4, noto anche come AS160 (substrato di Akt di 160 kDa), è una proteina multidominio che funge da proteina attivatrice della GTPasi (GAP) per proteine Rab, tra cui RAB2A, RAB8A, RAB10 e RAB14.
• L'isoforma 2 di TBC1D4 svolge un ruolo critico nella traslocazione di GLUT4 stimolata dall'insulina verso la membrana plasmatica, aumentando così l'assorbimento di glucosio negli adipociti e nelle cellule muscolari scheletriche.
• TBC1D4 è una fosfoproteina con molteplici siti di fosforilazione; la fosforilazione in Ser588 è associata alla segnalazione insulinica e regola la sua attività GAP e l'interazione con le proteine 14-3-3.
• La proteina è ampiamente espressa, con l'isoforma 1 altamente espressa nel muscolo scheletrico e nel cuore, mentre l'isoforma 2 è abbondante nella ghiandola surrenale, tiroide, polmone, rene, colon, cervello e tessuto adiposo.
• Nelle isole pancreatiche, l'espressione di TBC1D4 è ridotta nei pazienti con diabete di tipo 2, collegandola alla fisiopatologia del diabete mellito.
• A livello subcellulare, TBC1D4 si localizza principalmente nel citoplasma, dove interagisce con vescicole e componenti di segnalazione.
• Ulteriori modifiche post-traduzionali includono acetilazione e metilazione, che possono modulare ulteriormente la sua funzione.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Per il Western blot (WB), considerare l'uso di lisati cellulari integrali da cellule stimolate con insulina rispetto a non stimolate per validare il rilevamento dipendente dalla fosforilazione; includere inibitori delle fosfatasi durante la preparazione del campione.
• A causa dell'elevato peso molecolare (~147 kDa), utilizzare una percentuale di gel appropriata e condizioni di trasferimento per garantire un rilevamento efficiente; verificare la dimensione della banda con un marcatore di peso molecolare.
• In ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato per il rilevamento di fosfo-peptidi; includere controlli con peptidi non fosforilati per confermare la specificità.
• L'anticorpo mostra reattività incrociata con TBC1D4 umano, di topo e di ratto; validare nel contesto di specie e tessuto rilevanti, tenendo presenti i profili di espressione tessuto-specifici.
• Essendo un anticorpo policlonale di coniglio, la consistenza da lotto a lotto può variare; considerare una rivalidazione quando si passa a un nuovo lotto.

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