Phospho-TIFA-T9 Rabbit pAb per WB e ELISA - Q96CG3

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della TIFA

• TIFA (proteina interagente con TRAF con dominio FHA A) è nota anche come T2BP, T6BP, TIFAA, PM14 e proteina attivatrice NF‑kappa‑B 20. Contiene un dominio forkhead‑associated (FHA) che media le interazioni dipendenti dalla fosforilazione.
• TIFA funge da molecola adattatrice che svolge un ruolo chiave nell'attivazione della segnalazione pro‑infiammatoria NF‑kappa‑B a seguito del rilevamento di modelli molecolari associati ai patogeni batterici (PAMP). Riferimenti correlati: PMID:12566447, PMID:15492226, PMID:26068852
• Dopo il rilevamento dell'ADP‑eptosio (un PAMP batterico) da parte della chinasi ALPK1, ALPK1 fosforila la TIFA in Thr‑9, portando alla sua omo-oligomerizzazione. Riferimenti correlati: PMID:30111836
• La TIFA fosforilata e oligomerizzata promuove l'oligomerizzazione e la poliubiquitinazione di TRAF6, che a sua volta attiva TAK1 e IKK, guidando la trascrizione mediata da NF‑kappa‑B delle citochine.
• La TIFA è localizzata principalmente nel citoplasma, coerentemente con il suo ruolo nella trasmissione di segnali dai sensori patogenici citoplasmatici a cascata chinasiche a valle.
• Modificazione post-traduzionale: la fosforilazione in Thr‑9 è l'evento critico che avvia l'auto-associazione e la funzione di segnalazione della TIFA.
• Parole chiave UniProt: struttura 3D, Citoplasma, Immunità, Immunità innata, Fosfoproteina, Proteoma di riferimento.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è un peptide fosforilato sintetico circostante a Thr‑9 della TIFA umana; pertanto, si prevede che l'anticorpo riconosca specificamente la forma fosforilata in Thr‑9. Per il western blot, includere inibitori delle fosfatasi durante la preparazione del campione e considerare l'uso di un controllo di defosforilazione per confermare la specificità.
• Per le applicazioni ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato come reagente di cattura o rilevamento; convalidare l'abbinamento con anticorpi secondari appropriati e ottimizzare le condizioni di rivestimento per il formato dell'antigene.
• Un controllo positivo per la fosforilazione della TIFA può essere generato trattando le cellule con ADP‑eptosio o sovraesprimendo ALPK1, che induce potente la fosforilazione in Thr‑9.
• Dato il basso peso molecolare della TIFA (21 kDa), utilizzare gel SDS‑PAGE ad alta percentuale (12–15%) per una separazione e un trasferimento ottimali.

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