Anticorpo policlonale coniglio Phospho-TP73-Y99 per WB, ELISA - O15350

Specifiche e parametri principali del prodotto

Background biologico: Funzione e localizzazione di TP73

• TP73 codifica per la proteina tumorale p73, membro della famiglia dei fattori di trascrizione p53. Condivide omologia strutturale e funzionale con p53, inclusi i domini di legame al DNA e di transattivazione, ed esiste in diverse isoforme generate dall'uso di promotori alternativi e dallo splicing alternativo (UniProt: O15350).
• Le isoforme competenti per la transattivazione (TAp73) funzionano come fattori pro-apoptotici e soppressori tumorali, partecipando alla risposta al danno del DNA. Al contrario, le isoforme troncate all'N-terminale (ΔNp73) che mancano del dominio di transattivazione inibiscono le funzioni di p53 e TAp73, agendo come regolatori anti-apoptotici.
• TAp73 è un regolatore positivo essenziale della differenziazione delle cellule ciliate polmonari, attivando l'espressione di FOXJ1. Questo ruolo è fondamentale per la funzione epiteliale respiratoria e la ciliogenesi motile. Riferimenti correlati: PMID:34077761
• La localizzazione subcellulare di p73 è prevalentemente nucleare, coerente con la sua attività di fattore di trascrizione, anche se può essere rilevato anche nel citoplasma. Il traffico tra i compartimenti può regolare la sua accessibilità e la sua funzione.
• p73 è ampiamente espresso nei tessuti umani, tra cui cervello, rene, placenta, colon, cuore, fegato, milza, muscolo scheletrico, prostata, timo, pancreas e polmone, con livelli elevati nei tessuti fetali. A livello proteico, viene rilevato nei neuroni striatali di pazienti con malattia di Huntington e nell'epitelio respiratorio.
• Le modificazioni post-traduzionali, in particolare la fosforilazione (ad esempio alla tirosina 99), modulano la stabilità di p73, l'attività trascrizionale e le interazioni con chinasi a monte e partner di legame, collegandolo al controllo del ciclo cellulare e alla segnalazione dell'apoptosi.
• Le parole chiave associate a TP73 evidenziano il suo coinvolgimento nell'apoptosi, nel ciclo cellulare, nella regolazione della trascrizione, nella soppressione tumorale, nelle interazioni ospite-virus e il suo legame con patologie come la discinesia ciliare primaria e la lissencefalia.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• Questo anticorpo è stato ottenuto contro un peptide fosfo-specifico corrispondente ai residui intorno a Y99 della TP73 umana. Per Western blot, si consiglia di utilizzare un saggio di competizione con peptide fosfo-bloccante per confermare la rilevazione dipendente dalla fosforilazione.
• Considerato il ruolo di TP73 nella risposta al danno del DNA, il trattamento delle cellule con agenti genotossici (ad esempio etoposide, cisplatino) può aumentare la fosforilazione a Y99 e migliorare il segnale in WB.
• Il peso molecolare previsto della p73 full-length è di circa 70 kDa, ma esistono diverse isoforme. Convalidare l'identità della banda confrontando campioni trattati e non trattati e utilizzando marcatori di peso molecolare appropriati.
• Per le applicazioni ELISA, l'abbinamento di questo anticorpo con un anticorpo di cattura che riconosce un epitopo separato può aumentare la sensibilità. Includere controlli di peptide fosforilato e non fosforilato per valutare la specificità.

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