mAb coniglio anti Phospho-ZAP70-Y493 - P43403

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della ZAP70

• La ZAP70 (Tirosin-protein chinasi ZAP-70), anche chiamata tirosin chinasi correlata a Syk, è una proteina citoplasmatica di 70 kDa appartenente alla famiglia delle chinasi Syk.
• Svolge un ruolo fondamentale nell'immunità adattativa regolando la segnalazione dei recettori delle cellule T e B, influenzando la motilità, l'adesione, l'espressione di citochine e lo sviluppo dei timociti.
• Dopo l'attivazione del TCR, la ZAP70 viene reclutata presso i motivi ITAM fosforilati di CD3E e CD247/CD3Z sulla membrana plasmatica: questo processo annulla la sua autoinibizione e porta alla sua attivazione (PubMed:7509083). Riferimenti correlati: PMID:7509083
• La ZAP70 attivata fosforila le proteine adattatrici chiave LAT e LCP2, formando complessi di segnalazione che guidano la produzione di linfocine, la proliferazione e la differenziazione delle cellule T.
• La ZAP70 modula anche la dinamica del citoscheletro, l'adesione e la mobilità delle cellule T e partecipa alla downregolazione del TCR promuovendo l'internalizzazione e la degradazione di CD247/CD3Z tramite CBL e le proteine adattatrici SLA/SLA2.
• La localizzazione subcellulare è prevalentemente citoplasmatica e sulla membrana cellulare; l'espressione è limitata a cellule T, cellule natural killer, timociti precoci e cellule pro/pre B.
• Le modificazioni post-traduzionali includono fosforilazione (fondamentale per l'attività), acetilazione e ubiquitinazione; la proteina possiede domini SH2, un dominio chinasi legante l'ATP e molteplici siti di fosforilazione.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'anticorpo riconosce il sito di fosforilazione in corrispondenza della Tyr493, un residuo critico per l'attivazione della ZAP70; si consiglia di utilizzare inibitori di fosfatasi durante la preparazione del campione per preservare l'epitopo fosforilato.
• Per IF/ICC, convalidare la specificità della colorazione utilizzando un blocco con peptide non fosforilato o trattando le cellule con una fosfatasi per confermare la perdita del segnale.
• Questo anticorpo è adatto per ELISA; in caso di adattamento ad altri test immunologici, titrare e testare nella matrice di campione specifica per garantire linearità e sensibilità.

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