Anticorpo policlonale di coniglio anti-PIAS1 per WB ed ELISA - O75925

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di PIAS1

• PIAS1, nota anche come GBP, ZMIZ3, DDXBP1 o GU/RH-II, è una ligasi E3 della proteina SUMO e un fattore di ancoraggio di SUMO che catalizza l'attacco covalente di SUMO a substrati quali CEBPB, MRE11, PML e ZNF76. Riferimenti correlati: PMID:11583632 PMID:11867732 PMID:14500712
• Funziona come coregolatore trascrizionale in molteplici vie di segnalazione, comprese quelle di STAT, p53 e degli ormoni steroidei, dove può attivare o reprimere l'espressione genica a seconda del contesto biologico. Riferimenti correlati: PMID:11583632 PMID:11867732
• In vitro, PIAS1 si lega al DNA ricco in A/T, suggerendo un ruolo diretto nel targeting della cromatina o nella regolazione trascrizionale. Riferimenti correlati: PMID:15133049
• PIAS1 media la sumoilazione di MRE11, stabilizzando MRE11 sulla cromatina durante la resezione delle estremità del DNA e collegandola così alla riparazione del danno al DNA. Riferimenti correlati: PMID:36050397
• Potenzia la sumoilazione della proteina associata alle metastasi MTA1 e può partecipare alla sua sumoilazione selettiva rispetto ai paraloghi. Riferimenti correlati: PMID:21965678
• PIAS1 limita la replicazione litica del virus Epstein-Barr (EBV) inibendo i fattori di trascrizione necessari per l'espressione dei geni litici, sebbene il virus possa utilizzare le caspasi per contrastare questa restrizione. Riferimenti correlati: PMID:29262325
• A livello subcellulare, PIAS1 è localizzata principalmente nel nucleo, inclusi gli speckle nucleari e i corpi PML, ed è inoltre associata al citoscheletro.
• PIAS1 è espressa ubiquitariamente, ma mostra i livelli di espressione più elevati nei testicoli, come indicato dal profilo di espressione tissutale.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno comprende la regione N-terminale (aa 1–140) della PIAS1 umana; si consiglia di considerare l'allineamento di sequenza con gli ortologhi di topo e ratto per valutare la reattività crociata negli esperimenti specifici.
• Per il Western blot (WB), è prevista una banda a circa 72 kDa. Validare l'anticorpo nel sistema costituito dal proprio lisato cellulare o tissutale, poiché le modifiche post-traduzionali o le isoforme possono influenzare la migrazione.
• Nelle applicazioni ELISA, si consiglia di utilizzare come controllo positivo una proteina ricombinante comprendente la regione dell'immunogeno, per confermare la specificità del legame.
• Essendo un anticorpo policlonale, la consistenza tra lotti può variare; si raccomanda di includere controlli positivi e negativi appropriati e di ottimizzare la diluizione di lavoro per ogni nuovo lotto.
• Poiché PIAS1 è prevalentemente nucleare, l'utilizzo di lisati arricchiti in frazione nucleare può migliorare la sensibilità di rilevazione nel WB.
• Per l'analisi quantitativa del WB, normalizzare utilizzando la colorazione delle proteine totali, ad esempio la tecnologia stain-free, oppure una proteina housekeeping validata, per garantire confronti accurati del caricamento.

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