PIAS3 pAb di coniglio per WB, IHC-P, ELISA - Q9Y6X2

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di PIAS3

• PIAS3 (Inibitore proteico di STAT3 attivato) è una SUMO-proteina ligasi E3 e un fattore di legame SUMO che stabilizza l'interazione tra l'enzima E2 UBE2I e i substrati per catalizzare la coniugazione del SUMO. Riferimenti correlati: PMID:21965678, PMID:9388184
• Funge da coregolatore trascrizionale in molteplici vie di segnalazione, in particolare inibisce l'attività di legame al DNA di STAT3 e sopprime la crescita cellulare mediata da STAT3.
• PIAS3 aumenta la sumoilazione della proteina associata alla metastasi MTA1 e può contribuire alla sumoilazione selettiva del paralogo di questa proteina. Riferimenti correlati: PMID:21965678
• Sumoyla CCAR2 (DBC1), il che facilita l'interazione tra CCAR2 e la deacetilasi SIRT1, collegando la modifica SUMO alle reti regolatorie della deacetilazione. Riferimenti correlati: PMID:25406032
• PIAS3 può ridurre la sumoilazione di ZFHX3 (ATBF1) impedendone la colocalizzazione con SUMO1 nel nucleo, modulando di conseguenza la funzione di repressore trascrizionale di ZFHX3. Riferimenti correlati: PMID:24651376
• La proteina si localizza prevalentemente nel citoplasma, nel nucleo e nei speckle nucleari, coerente con i suoi ruoli nella segnalazione subnucleare e nella regolazione della trascrizione.
• PIAS3 è ampiamente espresso in tutti i tessuti umani e contiene un dominio a dito di zinco essenziale per la sua attività di ligasi e per il riconoscimento del substrato.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno bersaglia la regione C-terminale (a.a. 452–628) di PIAS3 umano; l'anticorpo può riconoscere più isoforme o forme modificate post-traduzionalmente. Se la reattività crociata con i membri della famiglia PIAS è un problema, si consiglia di verificare la specificità per l'isoforma di interesse tramite allineamento di sequenza e mappatura dell'epitopo.
• Per il Western blotting, il peso molecolare previsto è di circa 68 kDa; tuttavia, le specie sumoilate, fosforilate o modificate post-traduzionalmente possono produrre bande aggiuntive a migrazione superiore o anomala. Validare nel proprio sistema di campioni utilizzando controlli positivi e negativi appropriati.
• Nell'immunistochimica (paraffina), possono essere necessari metodi di recupero dell'antigene come il recupero dell'epitopo indotto dal calore (HIER) per una rilevazione ottimale. Data la localizzazione prevista nel citoplasma e nel nucleo, confermare i pattern di colorazione con dati di espressione noti.
• Per l'ELISA, l'immunogeno ricombinante o la proteina PIAS3 full-length possono essere utilizzati come antigene di cattura. Ottimizzare le concentrazioni di rivestimento e le condizioni di prova, includere antigeni di controllo e anticorpi secondari di controllo appropriati per garantire la specificità.

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