Anticorpo policlonale di coniglio PIP5K1A per WB, IHC-P, ELISA - Q99755

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di PIP5K1A

• PIP5K1A codifica la fosfatidilinositolo 4-fosfato 5-chinasi alfa di tipo I (PIP5KIalpha) da 68 kDa, una lipide chinasi centrale nella segnalazione dei fosfoinositidi.
• Catalizza la conversione del fosfatidilinositolo 4-fosfato (PI4P) in fosfatidilinositolo 4,5-bisfosfato (PIP2), un secondo messaggero lipidico fondamentale. Questa attività rappresenta la via predominante per la sintesi di PIP2.
  Riferimenti correlati: PMID:21477596, PMID:22942276, PMID:8955136
• PIP2 funge da precursore per i secondi messaggeri inositolo 1,4,5-trisfosfato (IP3), diacilglicerolo (DAG) e fosfatidilinositolo-3,4,5-trisfosfato (PIP3), mediando quindi diverse cascate di trasduzione del segnale.
  Riferimenti correlati: PMID:19158393, PMID:20660631
• Attraverso la produzione di PIP2, PIP5K1A regola la dinamica del citoscheletro di actina, l'adesione cellulare, la motilità, il ruffling membranare e la formazione di adesioni focali. È richiesto per la fagocitosi, l'adesione piastrinica, la differenziazione dei cheratinociti e la traslocazione dei trasportatori di glucosio indotta dall'insulina.
• Nel nucleo, PIP5K1A attiva l'attività adenililtransferasica di TUT1 nei speck nucleari, regolando quindi la poliadenilazione di un sottoinsieme specifico di mRNA.
  Riferimenti correlati: PMID:18288197
• Si localizza sulla membrana cellulare, nel citoplasma, nel nucleo, nei speck nucleari e nelle proiezioni cellulari come ruffles e lamellipodi, riflettendo le sue funzioni multiple.
• È altamente espresso nel cuore, placenta, muscolo scheletrico, rene e pancreas, con livelli più bassi nel cervello, polmone e fegato.
• È classificato come fosfoproteina e proteina contenente legami isopeptidici con siti di coniugazione simile all'ubiquitina; lo splicing alternativo genera diverse isoforme.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno copre gli amminoacidi 231‑500 di PIP5K1A umano, una regione che probabilmente contiene epitopi conservati; la reattività crociata con il topo è attesa e supportata dall'omologia di sequenza in questo segmento. Si consiglia di eseguire un allineamento di sequenza per confermare la reattività con altre specie.
• Per il Western blotting, è prevista una banda vicino a 63 kDa. Utilizzare lisati da tessuti con elevata espressione di PIP5K1A (es. cuore, muscolo scheletrico) come controlli positivi e includere marcatori di peso molecolare per verificare la dimensione della banda.
• L'ELISA può essere utilizzata per la titolazione dell'anticorpo o la rilevazione dell'antigene. Validare il saggio utilizzando proteina PIP5K1A ricombinante o lisati cellulari e determinare le condizioni ottimali di rivestimento e rilevazione.
• Essendo un anticorpo policlonale, può rilevare più isoforme o prodotti di degradazione; confermare la specificità tramite esperimenti di knockdown o overexpression nel vostro sistema modello.

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