Anticorpo Monoclonale Coniglio PIWIL4 per WB, IF/ICC, ELISA - Q7Z3Z4

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di PIWIL4

• PIWIL4 (anche designato HIWI2 o MIWI2) è una proteina simile a Piwi e membro della famiglia Argonaute, centrale per il silenziamento genico mediato da piRNA.
• Essenziale per la spermatogenesi reprimendo gli elementi trasponibili e mantenendo l'integrità della linea germinale tramite la via piRNA (Per similarità).
• Funziona nel nucleo per silenziare i trasposoni attivi impegnando trascritti nascenti di elementi trasponibili e dirigendo la metilazione del DNA e la repressione (Per similarità).
• Mancante di attività endonucleasica, agisce come componente 'incompetente al taglio' nell'amplificazione (ping-pong) del piRNA, caricando piRNA tagliati da PIWIL2 per mirare ai loci genomici dei trasposoni (Per similarità).
• Induce la metilazione 'Lis-9' dell'istone H3 ad alcuni loci, contribuendo al silenziamento epigenetico. Riferimenti correlati: PMID:17544373
• Espresso ubiquitariamente nei tessuti umani, con rilevamento nella retina, nell'epitelio pigmentario retinico e in vari tipi cellulari. Riferimenti correlati: PMID:17544373 PMID:22483988 PMID:25038252 PMID:28025795 PMID:28711973
• Nelle cellule somatiche, si localizza nel nucleo e nel citoplasma; mantiene l'integrità dell'epitelio retinico tramite la segnalazione Akt/GSK3alpha/beta e la sovraespressione promuove la proliferazione oncogena. Riferimenti correlati: PMID:28025795 PMID:22483988

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 272-383 di PIWIL4 umano, una regione probabilmente conservata tra umano, topo e ratto in base alla reattività incrociata riportata; considerare l'utilizzo di questo anticorpo per rilevare PIWIL4 in queste specie.
• Per il Western blot (WB), è prevista una banda intorno a 97kDa; tuttavia, la migrazione effettiva può variare a causa di modifiche post-traduzionali o varianti di isoforma. Includere lisati di controllo positivi appropriati.
• Nell'immunofluorescenza/immunocitochimica (IF/ICC), prevedere sia una colorazione nucleare che citoplasmatica coerente con la distribuzione subcellulare di PIWIL4; ottimizzare le condizioni di fissazione e permeabilizzazione.
• Per l'ELISA, utilizzare la proteina PIWIL4 ricombinante (o l'immunogeno) come standard per stabilire i parametri del saggio; notare che l'anticorpo può riconoscere le forme di proteina denaturata e nativa poiché è stato sviluppato contro una proteina di fusione ricombinante.
• Validare la specificità dell'anticorpo nel sistema di campione pertinente (es. utilizzando controlli knockdown o knockout) per confermare il riconoscimento del bersaglio.

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