Anticorpo policlonale rabbit per PKLR per WB e ELISA - P30613

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di PKLR

• PKLR codifica per l'isoenzima piruvato chinasi L/R, noto anche come PK1, PKL e piruvato chinasi dei globuli rossi/epatica.
• Catalizza la conversione del fosfoenolpiruvato in piruvato con sintesi di ATP, un passaggio chiave della glicolisi. Riferimenti correlati: PMID:11960989
• PKLR produce il sottoprodotto 2-fosfolattato, che può inibire la produzione di fruttosio-2,6-bisfosfato; la defosforilazione da parte di PGP rimuove questa inibizione e permette alla glicolisi di procedere. Riferimenti correlati: PMID:27294321
• L'enzima è regolato allostericamente da fruttosio-1,6-bisfosfato e ATP, e richiede ioni metallici come magnesio, manganese e potassio per la sua attività.
• Lo splicing alternativo genera isoforme tessuto-specifiche espresse nei eritrociti e nel fegato.
• Le mutazioni in PKLR sono associate all'anemia emolitica ereditaria, e la proteina è soggetta a fosforilazione e altre modifiche post-traduzionali.

Linee guida sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 446-556, una regione che può essere accessibile sia in forma nativa che denaturata, supportando l'uso in WB e ELISA.
• Per il Western blot, si consiglia di utilizzare 10–20 µg di lisato cellulare e validare con controlli positivi e negativi appropriati, poiché la rilevazione può variare tra i campioni.
• Data la natura policlonale, la coerenza tra lotti deve essere verificata per i saggi quantitativi; includere un controllo di caricamento e standardizzare le condizioni di rilevazione.
• Durante l'allestimento dell'ELISA, titolare l'anticorpo e confermare la reattività crociata con PKLR di topo e ratto utilizzando proteine ricombinanti o estratti cellulari.

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