Anticorpo policlonale di coniglio specifico per PKM1 per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P14618

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di PKM1 (piruvato chinasi M1)

• PKM1 è un'isoforma della piruvato chinasi generata dallo splicing alternativo del gene PKM, espressa prevalentemente nei tessuti adulti (PubMed:18337823). Riferimenti correlati: PMID:18337823
• catalizza la fase finale e limitante della velocità della glicolisi, trasferendo un gruppo fosforile dal fosfoenolpiruvato (PEP) all'ADP e producendo ATP (PubMed:15996096, PubMed:1854723, PubMed:20847263). Riferimenti correlati: PMID:15996096, PMID:1854723, PMID:20847263
• PKM1 esiste come tetramero costitutivamente attivo e non richiede l'attivazione allosterica da parte del fruttosio-1,6-bisfosfato (FBP), a differenza dell'isoforma M2 embrionale (PubMed:20847263). Riferimenti correlati: PMID:20847263
• La localizzazione subcellulare è principalmente citoplasmatica, in accordo con il suo ruolo nella glicolisi.
• PKM1 è espressa nella maggior parte dei tessuti adulti differenziati, inclusi muscolo e cervello, ed è notevolmente assente o sottoregolata in molte cellule tumorali, nelle quali prevale M2 (PubMed:18337823). Riferimenti correlati: PMID:18337823
• La proteina è soggetta a diverse modifiche post-traduzionali, tra cui acetilazione, fosforilazione e metilazione, che possono regolarne l'attività e la stabilità.
• PKM1 svolge un ruolo fondamentale nel metabolismo energetico, determinando il destino dei carboni del glucosio verso la produzione di ATP anziché verso le vie biosintetiche.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico situato nella regione C-terminale (aa 350–450) di PKM1 umano, garantendo la specificità per l'isoforma. Convalidare la specificità confrontando l'espressione di PKM1 e PKM2 in lisati di controllo.
• Per il Western blotting, utilizzare lisati di tessuti adulti umani, di topo o di ratto, ad esempio muscolo scheletrico e cervello, come controlli positivi. Ottimizzare la diluizione dell'anticorpo in base al tipo di campione.
• Nell'immunoistochimica (IHC-P) e nell'immunofluorescenza (IF/ICC), prevedere una colorazione citoplasmatica. Includere passaggi appropriati di recupero antigenico e blocco.
• Gli anticorpi policlonali possono presentare variabilità da lotto a lotto; per gli esperimenti critici, considerare una convalida specifica per lotto.
• La reattività crociata con topo e ratto consente l'uso in organismi modello comuni, ma confermare l'omologia di sequenza della regione immunogena qualora vengano testate specie aggiuntive.

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