POLR2A Rabbit pAb per WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA, ChIP - P24928

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione della POLR2A

• La subunità RPB1 della RNA polimerasi II diretta dal DNA (POLR2A) è la subunità più grande e catalitica della RNA polimerasi II, essenziale per la trascrizione dei geni codificanti proteine e di numerosi RNA non codificanti. Riferimenti correlati: PMID:23748380 PMID:27193682 PMID:30190596 PMID:28108474
• La polimerasi catalizza l'aggiunta di ribonucleotidi diretta dallo stampo, con il sito attivo coordinato da ioni magnesio; possiede inoltre un'attività esonucleasica di proofreading in direzione 3'→5'. Riferimenti correlati: PMID:8381534 PMID:9852112
• Un dominio C-terminale (CTD) unico, contenente 52 ripetizioni di eptapeptidi, agisce come centro regolatore; la fosforilazione della Ser5 facilita il distacco dal promotore, mentre quella della Ser2 favorisce l'allungamento e la maturazione del pre-mRNA. Riferimenti correlati: PMID:24207025 PMID:26124092
• Oltre alla trascrizione DNA-dipendente, la POLR2A può funzionare come RNA polimerasi RNA-dipendente, estendendo RNA non codificanti mediante uno stampo interno e influenzando potenzialmente il silenziamento genico.
• È localizzata principalmente nel nucleo, con presenza nel citoplasma e sui cromosomi; le modificazioni post-traduzionali includono acetilazione, metilazione, ubiquitinazione e fosforilazione.
• Le mutazioni nella POLR2A sono associate a disturbi del neurosviluppo e la proteina è bersaglio di virus come il virus dell'epatite delta per la replicazione del proprio genoma.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• Per il Western blot, a causa delle grandi dimensioni della proteina (217 kDa), utilizzare un gel di poliacrilammide al 6-8% e garantire un trasferimento efficiente, ad esempio mediante trasferimento umido con metanolo al 10%. Si può prendere in considerazione un controllo positivo costituito da lisato cellulare HeLa o HEK293.
• Per IF/ICC e IHC-P, è necessario ottimizzare le condizioni di fissazione e recupero antigenico; per i bersagli nucleari intracellulari può essere necessaria la permeabilizzazione con Triton X-100.
• Per il ChIP, la localizzazione dell'epitopo N-terminale suggerisce l'idoneità al rilevamento della POLR2A nativa, ma si raccomanda la validazione con geni bersaglio positivi e negativi.
• Essendo un anticorpo policlonale, ci si aspetta una coerenza tra i diversi lotti, che tuttavia dovrebbe essere verificata nell'applicazione prevista.

CamelBio: il vostro partner unico per l'approvvigionamento

CamelBio offre un portafoglio selezionato di anticorpi di grado IVD, incluso l'anticorpo policlonale di coniglio anti-POLR2A, ottimizzato per applicazioni quali Western blot, immunofluorescenza e immunoprecipitazione della cromatina. In qualità di partner dedicato per l'approvvigionamento dei produttori di diagnostici, forniamo materie prime validate e possiamo assistervi con requisiti personalizzati, dalla produzione di anticorpi in grandi volumi ai reagenti accessori, accelerando lo sviluppo del vostro test dal concept alla clinica.