Anticorpo policlonale di coniglio anti-PTPRA per WB ed ELISA - P18433

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di PTPRA

• PTPRA (protein-tirosina fosfatasi alfa di tipo recettoriale) è un membro della famiglia delle protein-tirosina fosfatasi classiche, contenente due domini fosfatasici intracellulari e una singola regione transmembrana.
• Funziona principalmente nella dinamica delle adesioni focali mediate dalle integrine, reclutando le proteine adattatrici BCAR3, BCAR1 e CRK nei siti di adesione in seguito all'attivazione delle integrine.
• Questo reclutamento facilita la fosforilazione di BCAR1 mediata da SRC e la successiva attivazione della chinasi PAK e delle piccole GTPasi RAC1 e CDC42, regolando la riorganizzazione del citoscheletro.
• PTPRA si localizza prevalentemente nella membrana cellulare ed è arricchita nelle giunzioni cellulari e nelle adesioni focali, in linea con il suo ruolo nella segnalazione mediata dall'adesione.
• La proteina è sottoposta a splicing alternativo ed è glicosilata, con un peso molecolare predetto di circa 90,7 kDa, spesso osservato a 91 kDa negli immunoblot.
• Le principali modificazioni post-traduzionali includono la fosforilazione di residui multipli e la proteina è classificata con parole chiave quali struttura 3D, glicoproteina, idrolasi e proteoma di riferimento.
• Sebbene sia studiata principalmente nell'uomo, l'espressione conservata nel topo e nel ratto è alla base della sua reattività crociata in queste specie.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno comprende gli amminoacidi 175-295 all'interno del dominio extracellulare, suggerendo che l'anticorpo possa rilevare forme glicosilate e precursori; la deglicosilazione può semplificare i pattern delle bande.
• Per il Western blot, si raccomandano condizioni standard riducenti e un gel SDS-PAGE al 7,5-10%; l'arricchimento delle frazioni di membrana o delle preparazioni di adesioni focali può aumentare l'intensità del segnale.
• È prevista una banda vicina a 91 kDa; verificare il peso molecolare con un ladder appropriato e considerare la possibilità di varianti di splicing alternative con dimensioni leggermente diverse.
• Per l'ELISA, titolare l'anticorpo come reagente di cattura o rilevazione contro frammenti ricombinanti di PTPRA o lisati cellulari; validare la specificità utilizzando modelli cellulari con sovraespressione di PTPRA rispetto a modelli con knockdown.
• La reattività crociata con topo e ratto è stata confermata, ma è sempre necessario validarla nel proprio specifico sistema cellulare o tissutale a causa delle potenziali variazioni degli epitopi.

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