Anticorpo monoclonale di coniglio anti-CD8a per citometria a flusso - P01732

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di CD8a

• CD8a (catena alfa della glicoproteina di superficie dei linfociti T CD8) è una proteina transmembrana nota anche come antigene di differenziazione dei linfociti T T8/Leu-2. È codificata dal gene CD8A (Gene ID: 925) e svolge un ruolo fondamentale nell'immunità adattativa.
• Nei linfociti T, CD8a funziona come co-recettore per le molecole MHC di classe I. Si lega simultaneamente al recettore dei linfociti T (TCR) e all'MHC di classe I sulle cellule presentanti l'antigene, determinando il reclutamento della tirosin-chinasi LCK. Questo avvia cascate di segnalazione intracellulari che promuovono l'attivazione dei linfociti T citotossici (CTL), la produzione di citochine e l'eliminazione delle cellule bersaglio.
• CD8 può esistere come eterodimero legato da ponti disolfuro con CD8b (alfa/beta) oppure come omodimero CD8a. La forma omodimerica è presente in sottopopolazioni di cellule natural killer (NK), linfociti T della memoria, linfociti intraepiteliali, monociti e cellule dendritiche.
• Nelle cellule NK, gli omodimeri CD8a facilitano la coniugazione con le cellule bersaglio e la loro lisi, promuovendo inoltre la sopravvivenza e la differenziazione dei linfociti attivati in linfociti T CD8 della memoria.
• A livello subcellulare, CD8a si localizza nella membrana cellulare ed è anche secreto. Contiene un peptide segnale, un dominio transmembrana e domini simili alle immunoglobuline.
• Le modifiche post-traduzionali includono glicosilazione, palmitoilazione e formazione di ponti disolfuro intramolecolari, essenziali per la sua stabilità e funzione.
• Espressione tissutale: sui linfociti T derivati dal timo, generalmente come eterodimero alfa/beta; sulle cellule dendritiche plasmacitoidi in seguito alla stimolazione con il virus herpes simplex-1; e su varie sottopopolazioni di cellule immunitarie come omodimeri.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• Questo anticorpo è direttamente coniugato con , eliminando la necessità di un anticorpo secondario nei flussi di lavoro di citometria a flusso. Includere nel pannello controlli isotipici appropriati e la discriminazione delle cellule vive/morte.
• Preparare sospensioni di cellule singole a partire da campioni umani o di scimmia cynomolgus freschi o correttamente crioconservati. Si raccomanda il blocco dei recettori Fc per ridurre il legame aspecifico.
• L'immunogeno corrisponde al dominio extracellulare (amminoacidi 22-182), garantendo il riconoscimento della forma nativa legata alla membrana. Validare la specificità utilizzando popolazioni cellulari positive note (ad esempio, PBMC umane) e popolazioni cellulari negative.
• I molteplici pesi proteici riportati (21, 25, 30 kDa) riflettono probabilmente una glicosilazione differenziale o la presenza di isoforme. Confermare il profilo delle bande atteso nel tipo cellulare target utilizzando tecniche complementari come il Western blot.
• Sebbene sia stato progettato principalmente per la citometria a flusso, l'idoneità per applicazioni diverse (ad esempio, ICC, IHC) può essere possibile; si consiglia di effettuare test preliminari nelle proprie condizioni specifiche.

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