mAb coniglio anti-BCL6 umano - P41182

Specifiche e parametri principali del prodotto

Background biologico: Funzione e localizzazione di BCL6

• BCL6 (B‑cell lymphoma 6) è un repressore trascrizionale membro della famiglia BTB‑POZ/zinc finger, essenziale per la formazione dei centri germinativi (GC) e la maturazione dell'affinità anticorpale.
• BCL6 si lega direttamente alla sequenza consenso del DNA 5’‑TTCCTAGAA‑3’ e forma complessi con corepressori e istone deacetilasi per silenziare i geni target coinvolti nel controllo della differenziazione, dell'apoptosi e del ciclo cellulare.
• Nelle cellule B del centro germinativo, BCL6 permette una proliferazione rapida e tollera le rotture del DNA durante la ricombinazione per cambio di classe e l'ipermutazione somatica, sopprimendo contemporaneamente l'apoptosi dipendente da p53.
• Nelle cellule T follicolari helper (TFH), BCL6 promuove l'espressione genica associata a TFH e inibisce la differenziazione verso i lignaggi TH1, TH2 o TH17.
• BCL6 è inoltre necessario per l'instaurazione e il mantenimento della memoria immunologica sia nelle cellule T che B e sopprime la proliferazione dei macrofagi competendo con STAT5 per il legame al DNA.
• La proteina si localizza esclusivamente nel nucleo (UniProt: LOCALIZZAZIONE SUBCELLULARE) e subisce molteplici modifiche post-traduzionali, tra cui acetilazione, fosforilazione e ubiquitinazione, che regolano la sua attività.
• La forma umana di BCL6 è espressa in due isoforme principali di circa 72 kDa e 78 kDa, derivate da splicing alternativo; viene rilevata principalmente nelle cellule T e B dei centri germinativi e nelle cellule dendritiche immature.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde ai residui 235–350 di BCL6 umano, una regione all'interno del dominio BTB N-terminale. Questo dominio media le interazioni proteina-proteina e si prevede che l'anticorpo riconosca BCL6 nativa in citometria a flusso intracellulare dopo fissazione e permeabilizzazione.
• Per la colorazione intracellulare (FC intra), utilizzare opportuni buffer di fissazione/permeabilizzazione (ad esempio a base di paraformaldeide/saponina) e titolare l'anticorpo per determinare la concentrazione ottimale per il tuo specifico tipo cellulare e sistema sperimentale.
• Conferma i modelli di espressione di BCL6 nei tuoi campioni utilizzando controlli positivi noti come le cellule dei centri germinativi di tonsilla o linfonodo umano, e includi controlli isotipici per escludere il legame non specifico.
• Poiché BCL6 funziona come repressore, combina questo anticorpo con marcatori di differenziazione delle cellule B (ad esempio CD20, CD38) o delle cellule T follicolari helper (ad esempio CXCR5, PD‑1) per la citometria a flusso multiparametrica.

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