Anticorpo Monoclonale Coniugato di Coniglio anti-BCL6 Umano per Citometria a Flusso (Intracellulare) - P41182

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di BCL6

• BCL6 (B-cell lymphoma 6) è un repressore trascrizionale e un proto-oncogene, noto anche come BCL5, LAZ3, ZBTB27 e ZNF51, che codifica per una proteina contenente domini zinc-finger e BTB/POZ.
• È un regolatore principale delle reazioni del centro germinativo (GC), reprime i geni coinvolti nella differenziazione, infiammazione, apoptosi e ciclo cellulare per consentire la rapida proliferazione dei linfociti B e l'ipermutazione somatica.
• BCL6 si lega direttamente al motivo specifico di DNA 5'-TTCCTAGAA-3' e reprime anche fattori di trascrizione, regolando indirettamente al rialzo AICDA sopprimendo microRNA come miR-155.
• Nei linfociti T helper follicolari (TFH), BCL6 promuove l'espressione genica specifica dei TFH mentre inibisce la differenziazione nei lignaggi TH1, TH2 e TH17, ed è essenziale per la memoria immunologica sia nei linfociti T che B.
• Oltre che nei linfociti, BCL6 sopprime la proliferazione dei macrofagi competendo con STAT5 per i siti di legame su geni bersaglio come CCL2 e CCND2.
• BCL6 si localizza prevalentemente nel nucleo, in linea con la sua funzione di regolatore trascrizionale legante il DNA.
• È espresso nei linfociti T e B del centro germinativo e nelle cellule dendritiche immature primarie; un'espressione aberrante è implicata nei linfomi a cellule B attraverso riarrangiamenti cromosomici.
• Le modificazioni post-traduzionali includono acetilazione, fosforilazione e ubiquitinazione, che modulano la sua stabilità, attività repressiva e interazione con corepressori.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno (residui 235–350 del BCL6 umano/murino) corrisponde a una regione centrale contenente domini funzionalmente importanti; l'accessibilità dell'epitopo nella colorazione intracellulare può dipendere da un'efficace permeabilizzazione nucleare.
• Per la citometria a flusso, utilizzare protocolli di fissazione e permeabilizzazione validati per proteine nucleari, e includere un controllo isotipo appropriato nonché popolazioni cellulari positive note (es. linee cellulari di linfociti B Ramos, Daudi) e negative.
• La concentrazione dell'anticorpo deve essere ottimizzata mediante titolazione; l'applicazione fornita è la citometria a flusso intracellulare—altre applicazioni non sono state testate e richiedono una validazione individuale.
• L'espressione di BCL6 può essere transiente e dipendente dal contesto; considerare condizioni di stimolazione o differenziazione per modulare i livelli di espressione nei sistemi sperimentali.

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