Anticorpo monoclonale coniglio anti-umano BCL6 per citometria a flusso intracellulare - P41182

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di BCL6

• BCL6 è un repressore trascrizionale essenziale per la formazione del centro germinativo (GC) e la maturazione dell'affinità anticorpale, regolando geni coinvolti nella differenziazione, nell'infiammazione, nell'apoptosi e nel controllo del ciclo cellulare.
• Si lega direttamente alla sequenza di DNA 5'-TTCCTAGAA-3' (sito di legame di BCL6) o reprime indirettamente l'attività trascrizionale di altri fattori di trascrizione.
• BCL6 consente alle cellule B del GC di proliferare rapidamente e tollerare rotture del DNA durante la ricombinazione di scambio di classe delle immunoglobuline e l'ipermaturazione somatica senza innescare una risposta apoptotica dipendente da p53.
• Nelle cellule T CD4+ helper follicolari (cellule T(FH)), BCL6 promuove l'espressione di geni correlati alle T(FH) mentre inibisce la differenziazione delle cellule T(H)1, T(H)2 e T(H)17.
• Contribuisce anche all'instaurazione e al mantenimento della memoria immunologica sia per le cellule T che per le cellule B e sopprime la proliferazione dei macrofagi competendo con STAT5 per il legame al DNA.
• Modificazioni post-traduzionali come acetilazione, fosforilazione e coniugazione simile all'ubiquitina modulano l'attività di BCL6.
• La localizzazione subcellulare è nucleare, dove interagisce con corepressori e istoni deacetilasi per reprimere i geni target.
• Specificità tissutale: espresso prevalentemente nelle cellule B e T del centro germinativo e nelle cellule dendritiche immature primarie.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• Questo anticorpo è stato generato contro una proteina ricombinante che comprende gli amminoacidi 235-350 del BCL6 umano. Per la citometria a flusso intracellulare, ottimizzare i protocolli di fissazione e permeabilizzazione cellulare per garantire l'accessibilità dell'antigene nucleare.
• Considerare la validazione dell'anticorpo in linee cellulari B del centro germinativo umano rilevanti, modelli di cellule T(FH) o cellule immunitarie primarie, e confermare la specificità utilizzando controlli di knockdown o knockout di BCL6, se possibile.
• A causa della sua localizzazione nucleare, potrebbero essere necessari buffer di permeabilizzazione con detergenti forti per una colorazione ottimale.

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