Anticorpo monoclonale coniugato di coniglio anti-umano CD100/SEMA4D per IF/ICC, FC - Q92854

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della Semaforina-4D

• La Semaforina-4D (CD100, SEMA4D) è un recettore di superficie cellulare e una proteina secreta appartenente alla famiglia delle semaforine, con splicing alternativo che produce più isoforme. Svolge un ruolo cruciale nella segnalazione cellula-cellula attraverso interazioni con i recettori PLXNB1 e PLXNB2. Riferimenti correlati: PMID:20877282
• Nel sistema nervoso, SEMA4D regola lo sviluppo delle sinapsi GABAergiche e promuove la formazione di sinapsi inibitorie in modo dipendente da PLXNB1. Modula la complessità e l'arborizzazione dei neuriti nei neuroni dell'ippocampo attivando PLXNB1 e RHOA. Riferimenti correlati: PMID:19788569
• SEMA4D promuove la migrazione delle cellule granulari del cervelletto e induce la migrazione delle cellule endoteliali attraverso la via PTK2B/PYK2, SRC e PI3K-AKT. Riferimenti correlati: PMID:16055703
• Nel sistema immunitario, SEMA4D induce l'aggregazione delle cellule B e ne migliora la vitalità in vitro, evidenziando le sue funzioni immunomodulatorie. Riferimenti correlati: PMID:8876214
• La proteina subisce modificazioni post-traduzionali tra cui glicosilazione N e fosforilazione, e contiene ponti disolfuro essenziali per la sua integrità strutturale. Le parole chiave indicano che è una glicoproteina transmembrana, una proteina dello sviluppo e una fosfoproteina correlata alla neurogenesi.
• A livello subcellulare, SEMA4D è localizzata sulla membrana cellulare e può essere secreta, in linea con il suo duplice ruolo di recettore di superficie e ligando solubile.
• I tessuti con alta espressione includono muscolo scheletrico, linfociti del sangue periferico, milza e timo; un'espressione più bassa è rilevata in testicoli, cervello, rene, intestino tenue, prostata, cuore, placenta, polmone e pancreas.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione extracellulare (amminoacidi 22-734) della SEMA4D umana, suggerendo che l'anticorpo possa riconoscere sia la forma legata alla membrana che quella secreta. Per IF/ICC, la permeabilizzazione potrebbe non essere strettamente necessaria se si mira a SEMA4D di superficie, ma considerare una lieve permeabilizzazione per accedere agli epitopi intracellulari se necessario.
• Questo coniugato consente il rilevamento diretto della fluorescenza, riducendo al minimo i passaggi con anticorpi secondari. Per la citometria a flusso, confermare la titolazione ottimale dell'anticorpo e includere controlli isotipo appropriati per garantire una colorazione specifica sulla popolazione cellulare target.
• Quando si studia la funzione di SEMA4D in saggi di segnalazione cellulare o migrazione, convalidare la reattività dell'anticorpo nelle linee cellulari umane pertinenti (es. linfociti, cellule neuronali) nelle condizioni sperimentali utilizzate.

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