Anticorpo Monoclonale di Coniglio anti-Umano CD101/IGSF2 per IF/ICC e FC - Q93033

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di CD101/IGSF2

• CD101 (IGSF2, V7, EWI-101) è una glicoproteina transmembrana appartenente alla superfamiglia delle immunoglobuline, caratterizzata da domini extracellulari simili a immunoglobuline e una coda citoplasmatica.
• Funziona come regolatore negativo dell'attivazione delle cellule T: inibisce la proliferazione indotta da CD3, riduce l'espressione di IL2RA (CD25) e diminuisce la secrezione di IL-2.
• Meccanicamente, CD101 sopprime le tirosin chinasi, la fosforilazione di PLCG1 e il flusso di calcio, bloccando così la traslocazione nucleare di NFAT essenziale per l'attivazione delle cellule T.
• La proteina è espressa sulla membrana plasmatica di cellule T attivate, monociti, granulociti e cellule dendritiche cutanee, ed è presente nei tessuti di polmone, timo e intestino tenue.
• CD101 è rilevato anche in alcune cellule leucemiche, in particolare cellule tumorali blastiche CD4+ CD56+, e nelle cellule di Langerhans di pazienti con istiocitosi a cellule di Langerhans.
• Le parole chiave UniProt evidenziano le sue caratteristiche strutturali: peptide segnale, ponti disolfuro, domini di immunoglobulina, elica transmembrana e glicosilazione.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno (aa 21-410) copre quasi l'intera regione extracellulare, quindi è probabile che l'anticorpo riconosca la conformazione nativa; è ben adatto per rilevare CD101 di superficie cellulare mediante IF/ICC e citometria a flusso.
• Per IF/ICC, provare la fissazione con paraformaldeide con e senza permeabilizzazione per ottimizzare la colorazione localizzata sulla membrana; il rilevamento solo di superficie può evitare il fondo dovuto alle forme di transito intracellulari.
• Nella citometria a flusso, includere controlli isotipo appropriati e validare su tipi di campioni umani noti per esprimere CD101, come cellule T attivate o cellule dendritiche.
• Sebbene non sia elencata come applicazione validata, l'anticorpo potrebbe teoricamente funzionare nel western blot (peso molecolare previsto ~115 kDa); qualsiasi utilizzo per WB dovrebbe essere verificato in modo indipendente dall'utente.
• L'anticorpo è coniugato con , un colorante fluorescente rosso stabile; per protocolli indiretti utilizzare un anticorpo secondario anti-coniglio compatibile con l'eccitazione/emissione del colorante.

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