Anticorpo monoclonale coniglio anti-umano CD13/ANPEP per Citometria a Flusso - P15144

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di CD13/ANPEP

• L'aminopeptidasi N (ANPEP), nota anche come CD13 o gp150, è una metalloproteasi legata alla membrana dipendente dallo zinco, appartenente alla famiglia M1 delle aminopeptidasi.
• Presenta un'ampia specificità per il substrato e svolge un ruolo critico nella digestione finale dei peptidi nell'intestino e nel processamento di peptidi bioattivi, tra cui angiotensina III/IV, neuropeptidi e chemochine.
• Funge da recettore per la glicoproteina spike del coronavirus umano 229E (HCoV-229E) e media l'infezione da citomegalovirus umano (HCMV).
• È coinvolto nell'angiogenesi e nella cristallizzazione del colesterolo, con un'espressione upregolata sulla vascolatura di tumori e tessuti infiammati.
• È localizzato sulla membrana cellulare con un grande dominio extracellulare e funge da molecola di segnalazione nell'adesione cellulare, nella migrazione e nella differenziazione.
• È espresso su granulociti, monociti, cellule endoteliali e cellule epiteliali di rene, intestino e tratto respiratorio; si trova anche su alcune cellule del sistema nervoso centrale e sulla vascolatura tumorale.
• Una forma solubile è presente nel plasma, con livelli elevati osservati nel plasma e negli versamenti di pazienti oncologici, evidenziando il suo potenziale come biomarcatore di malattia.
• È modificato post-traduzionalmente tramite glicosilazione, formazione di legami disolfuro e solfatazione; le strutture cristallografiche confermano l'organizzazione del dominio extracellulare e il sito catalitico legante lo zinco.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• CD13 è un marcatore di superficie cellulare comunemente utilizzato nell'immunofenotipizzazione; la citometria a flusso con questo coniugato consente una rilevazione sensibile su cellule vive e non fissate.
• Titrare l'anticorpo per determinare la concentrazione ottimale per il proprio sistema sperimentale; un intervallo di 0,1–1,0 μg per milione di cellule è un punto di partenza ragionevole.
• Includere controlli negativi appropriati (ad esempio, coniugato di controllo isotipico, cellule non colorate) e considerare il blocco dei recettori Fc per minimizzare il legame non specifico.
• Poiché l'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 69–967 del dominio extracellulare, l'anticorpo riconosce probabilmente un epitopo sulla superficie cellulare, rendendolo adatto per la colorazione di cellule vive.
• Convalidare le prestazioni in campioni umani rilevanti come le cellule mononucleate del sangue periferico (PBMC), linee cellulari leucocitarie o biopsie tumorali, dove è prevista l'espressione di CD13.

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