Anticorpo monoclonale di coniglio anti-CD141/Trombomodulina umana per citometria a flusso - P07204

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione della trombomodulina

• La trombomodulina (CD141/BDCA-3, nota anche come fetomodulina) è un recettore transmembrana espresso abbondantemente sulle cellule endoteliali vascolari, con funzioni nell'emostasi, nella coagulazione, nella fibrinolisi, nell'infiammazione e nell'angiogenesi. Riferimenti correlati: PMID:10761923
• Agisce come cofattore per l'attivazione, mediata dalla trombina, della proteina C sulla superficie endoteliale, avviando la via anticoagulante. Riferimenti correlati: PMID:29323190, PMID:33836597, PMID:9395524
• La trombomodulina accelera l'attivazione della carbossipeptidasi B2 plasmatica (CPB2), che scinde gli amminoacidi basici C-terminali dalle chinine e dalle anafilotossine, contribuendo all'inibizione della fibrinolisi. Riferimenti correlati: PMID:26663133
• Sopprime l'infiammazione sequestrando la molecola pro-infiammatoria HMGB1, impedendone l'interazione con RAGE e altri recettori. Riferimenti correlati: PMID:15841214
• La proteina modifica la specificità di scissione del recettore 1 attivato dalle proteasi (PAR1), inibendo così la permeabilità endoteliale e l'infiammazione (per similitudine).
• Localizzazione subcellulare: prevalentemente legata alla membrana.
• Specificità tissutale: l'espressione è esclusiva delle cellule endoteliali.
• Le caratteristiche strutturali includono un dominio simile all'EGF, ponti disolfuro, glicosilazione e una modifica proteoglicanica; la proteina matura migra a circa 60 kDa.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• Questo coniugato è destinato alla colorazione in immunofluorescenza diretta e al rilevamento mediante citometria a flusso della CD141/Trombomodulina umana sulla superficie di cellule vive o fissate.
• La concentrazione ottimale dell'anticorpo deve essere determinata mediante titolazione nel sistema sperimentale pertinente; per la colorazione della superficie cellulare viene spesso utilizzato un intervallo iniziale di 0,5–5 µg/mL.
• Utilizzare un controllo isotipico appropriato e un colorante di vitalità per distinguere le cellule vive e ridurre al minimo il background.
• Per la preparazione dei campioni, evitare una digestione eccessiva con tripsina, poiché la trombomodulina è sensibile alla tripsina; prendere in considerazione l'uso di reagenti di dissociazione non enzimatici.
• CD141 è altamente espressa sulle cellule endoteliali vascolari; prendere in considerazione colture primarie di cellule endoteliali o cellule progenitrici endoteliali del sangue periferico come controllo positivo.
• Si noti che l'anticorpo riconosce un epitopo extracellulare; la permeabilizzazione non è necessaria per la colorazione di superficie, ma può essere impiegata per rilevare le frazioni intracellulari, se necessario, dopo la fissazione.

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