Anticorpo monoclonale di coniglio anti-umano CD158 (KIR2DL1/S1/S2/S3/S5) per citometria a flusso - Q14954 / Q14953 / Q14952 / P43631 / P43626

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di CD158 (KIR2DL1/S1/S2/S3/S5)

• KIR2DS1 (CD158H) è un membro della famiglia dei recettori killer immunoglobulin-like (KIR), caratterizzato da due domini immunoglobulinici extracellulari e una breve coda citoplasmatica priva di motivi inibitori basati sulla tirosina dell'immunorecettore (ITIM).
• Funge da recettore attivante sulle cellule natural killer (NK), riconoscendo specificamente alcuni alleli HLA-C come w6, e non inibisce l'attività delle cellule NK, promuovendo la citotossicità e il rilascio di citochine in seguito al legame con il ligando.
• La famiglia genica KIR è altamente polimorfica e si trova sul cromosoma 19q13.4; questo anticorpo reagisce in modo crociato con molteplici membri KIR, inclusi KIR2DS1, KIR2DS2, KIR2DS3, KIR2DL1 e KIR2DL3 a causa di epitopi condivisi, consentendo un'ampia rilevazione dei sottogruppi di cellule NK CD158-positive.
• KIR2DS1 è localizzato sulla membrana cellulare, tipico dei recettori transmembrana di tipo I, ed è espresso principalmente sulle cellule NK, svolgendo un ruolo chiave nella sorveglianza immunitaria e nella risposta alle cellule infettate da virus o trasformate.
• Le modifiche post-traduzionali includono la formazione di ponti disolfuro, la glicosilazione N-linked e la presenza di un peptide segnale N-terminale, che contribuiscono al corretto ripiegamento ed espressione sulla superficie.
• Le parole chiave UniProt evidenziano le sue caratteristiche come recettore di membrana, glicoproteina e membro della superfamiglia delle immunoglobuline, con ripetizioni strutturali comuni alle molecole KIR.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• Per la citometria a flusso, titolare l'anticorpo per determinare la concentrazione ottimale per il proprio tipo cellulare specifico, iniziando solitamente con un intervallo di 0,5–5 µg per test, e includere controlli isotipici appropriati.
• Quando si utilizzano pannelli multicolore, assicurarsi che siano preparati controlli di compensazione adeguati, poiché il fluoroforo potrebbe richiedere una compensazione per la sovrapposizione spettrale con coloranti simili.
• Validare l'anticorpo nel sistema di campioni pertinente, come le cellule mononucleate del sangue periferico umano (PBMC) o cellule NK isolate, e considerare l'utilizzo di reagenti di blocco del recettore Fc per ridurre al minimo il legame aspecifico.
• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 22-245, che coprono il dominio extracellulare del CD158; pertanto, si prevede che l'anticorpo rilevi i recettori espressi sulla superficie e potrebbe non riconoscere le forme intracellulari o non processate.
• Evitare l'azide di sodio se si eseguono saggi funzionali, poiché può interferire con la vitalità cellulare e l'attivazione delle cellule NK; utilizzare formulazioni prive di conservanti o lavare accuratamente le cellule prima delle applicazioni a valle.

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