mAb di coniglio anti-umano CD170/Siglec-5 per FC - O15389

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione della lectina 5 simile alle Ig che lega l'acido sialico

• SIGLEC5 codifica la lectina 5 simile alle Ig che lega l'acido sialico, nota anche come CD170, antigene CD33-like 2 (CD33L2) e proteina 2 legante l'obesità (OB-BP2).
• Funziona come una presunta molecola di adesione che media il legame dipendente dall'acido sialico alle cellule, riconoscendo sia gli acidi sialici legati in posizione α-2,3 sia quelli legati in posizione α-2,6 con affinità comparabile.
• Il sito di riconoscimento dell'acido sialico può essere mascherato da interazioni cis con gli acidi sialici presenti sulla stessa superficie cellulare, modulando il legame al ligando.
• Siglec-5 è una proteina transmembrana di tipo I localizzata sulla membrana cellulare, caratterizzata da una regione extracellulare con domini simili alle immunoglobuline di tipo V-set e C2-set, un segmento transmembrana e una coda citoplasmatica.
• La proteina contiene ponti disolfuro ed è glicosilata, caratteristiche tipiche dei membri della superfamiglia delle immunoglobuline.
• L'espressione è limitata alle cellule della linea monocitica/mieloide; è altamente espressa nei leucociti del sangue periferico, nella milza e nel midollo osseo, con livelli inferiori nei linfonodi, nei polmoni, nell'appendice, nella placenta, nel pancreas e nel timo. È presente su monociti e neutrofili, ma assente nelle linee cellulari leucemiche che rappresentano le fasi iniziali della differenziazione mielomonocitica.
• La voce curata di UniProt riporta parole chiave tra cui struttura 3D, adesione cellulare, lectina, dominio immunoglobulinico, glicoproteina e membrana.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno comprende l'intera regione extracellulare (amminoacidi 17–434), inclusi tutti e tre i domini simili alle Ig, probabilmente preservando gli epitopi conformazionali nativi importanti per il riconoscimento.
• Per la citometria a flusso, titolare l'anticorpo su linee cellulari mieloidi umane pertinenti o su cellule primarie del sangue periferico (ad es. monociti e neutrofili) per determinare la concentrazione ottimale.
• Considerare il pretrattamento delle cellule con sialidasi per rimuovere gli acidi sialici coinvolti nelle interazioni cis, che può rendere accessibile l'epitopo e aumentare l'intensità della colorazione in alcuni contesti.
• Includere appropriati controlli isotipici e controlli fluorescence-minus-one (FMO) per identificare accuratamente le popolazioni positive per Siglec-5.
• Validare le prestazioni dell'anticorpo nel sistema campione specifico di interesse, poiché i livelli di espressione possono variare in base allo stato di differenziazione e all'origine tissutale.

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