Anticorpo monoclonale coniugato di coniglio anti-CD22 umano per citometria a flusso - P20273

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di CD22

• CD22, noto anche come Siglec-2 o molecola di adesione cellulare dei linfociti B (BL-CAM), è una glicoproteina transmembrana appartenente alla famiglia delle lectine simili a immunoglobuline leganti l'acido sialico (Siglec). È altamente espresso sulle cellule B e funge da corecettore inibitorio che modula la segnalazione del recettore delle cellule B (BCR). Riferimenti correlati: PMID:34330755, PMID:8627166
• In seguito all'attivazione del BCR, i motivi inibitori basati sulla tirosina (ITIM) di CD22 vengono fosforilati dalla chinasi Src LYN, che recluta la fosfatasi tirosinica PTPN6 (SHP-1). Ciò porta all'attenuazione della mobilizzazione del calcio e dell'attivazione cellulare, regolando negativamente le risposte delle cellule B e potenzialmente inducendo apoptosi in caso di segnalazione forte. Riferimenti correlati: PMID:8627166, PMID:20516366
• CD22 lega specificamente i residui di acido sialico legati α2,6 su glicoproteine come CD45, IgM e lo stesso CD22 in una configurazione cis, e può anche fungere da molecola di adesione attraverso interazioni trans con ligandi su altre cellule. Riferimenti correlati: PMID:20172905
• La proteina svolge ruoli essenziali nella differenziazione delle cellule B, nella presentazione dell'antigene e nel traffico verso il midollo osseo, con la sua espressione limitata prevalentemente ai linfociti B maturi. Riferimenti correlati: PMID:34330755, PMID:8627166
• CD22 è soggetto a splicing alternativo, producendo varianti con numeri diversi di domini extracellulari simili a Ig; è anche altamente glicosilato e fosforilato, caratteristiche che contribuiscono alla sua funzione e regolazione.
• Il CD22 umano a lunghezza intera è composto da 847 amminoacidi con una massa molecolare calcolata di circa 95,3 kDa e contiene un peptide segnale N-terminale, sette domini di tipo C2 simili a Ig, un'elica transmembrana e una coda citoplasmatica con motivi ITIM e simili a ITIM.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno utilizzato (proteina ricombinante che comprende gli amminoacidi 20–687) copre l'intera regione extracellulare del CD22 umano, inclusi tutti i domini simili a Ig, il che aiuta a garantire il riconoscimento della proteina nativa su cellule vive.
• Essendo un anticorpo pre-coniugato (), questo reagente è pronto per la citometria a flusso diretta senza un passaggio di colorazione secondaria; tuttavia, titolare l'anticorpo su linee cellulari positive e negative rilevanti per determinare la concentrazione di lavoro ottimale.
• Le comuni linee cellulari di cellule B umane (ad es., Raji, Daudi, Ramos) esprimono alti livelli di CD22 e possono servire come controlli positivi; si consiglia un anticorpo di controllo isotipo per valutare il legame aspecifico.
• Per pannelli di citometria a flusso multicolore, includere controlli di compensazione della fluorescenza e considerare che l'espressione di CD22 può essere modulata dallo stato di attivazione delle cellule B.

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