Anticorpo monoclonale coniglio anti-CD28 umano per citometria a flusso e stimolazione delle cellule T - P10747

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione del CD28

• Il CD28 (glicoproteina di superficie specifica delle cellule T CD28, nota anche come Tp44) è un membro della superfamiglia delle immunoglobuline e funge da recettore di costimolazione essenziale per l'attivazione, la proliferazione e la sopravvivenza delle cellule T.
• Il coinvolgimento del CD28 da parte dei suoi ligandi CD80 (B7-1) o CD86 (B7-2) fornisce un critico secondo segnale che amplifica la segnalazione del recettore delle cellule T (TCR), portando a una produzione potenziata di interleuchina-2 (IL-2) e all'espansione delle cellule T. Riferimenti correlati: PMID:1650475, PMID:12196291, PMID:35397202
• La segnalazione del CD28 recluta la proteina chinasi C-theta (PRKCQ) e l'adattatore GRB2, attivando NF-κB tramite vie dipendenti e indipendenti da PI3K/Akt per modulare l'espressione genica nelle cellule T. Riferimenti correlati: PMID:24665965, PMID:21964608, PMID:7568038
• In congiunzione con la costimolazione TCR/CD3 e CD40L, il CD28 potenzia la produzione delle citochine Th2 IL-4 e IL-10, contribuendo alle risposte immunitarie umorali. Riferimenti correlati: PMID:8617933
• Il CD28 agisce in sinergia con CD40L per attivare NF-κB e le chinasi a valle MAPK8 e PAK2, diversificando ulteriormente le funzioni effetrici delle cellule T. Riferimenti correlati: PMID:15067037
• Il CD28 è espresso prevalentemente sulla superficie cellulare delle cellule T e delle plasmacellule, ma è assente dalle cellule B meno mature.
• La proteina CD28 è una glicoproteina transmembrana con un dominio extracellulare simile alle immunoglobuline, un'elica transmembrana singola e una coda citoplasmatica contenente motivi di segnalazione. Le modificazioni post-traduzionali includono ponti disolfuro, glicosilazione e fosforilazione.
• Lo splicing alternativo genera multiple isoforme di CD28, che possono modulare finemente i segnali di co-stimolazione in diversi sottogruppi di cellule T.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno, la proteina ricombinante CD28 umana, copre probabilmente il dominio extracellulare, rendendo l'anticorpo adatto per rilevare il CD28 di superficie nativo mediante citometria a flusso. Eseguire una titolazione su linee cellulari T umane o PBMC per determinare la diluizione di lavoro ottimale.
• Per l'attivazione delle cellule T in vitro, utilizzare l'anticorpo in combinazione con anti-CD3 per fornire segnali di costimolazione. I formati legati alla piastra o cross-linkati possono potenziare l'aggregazione; esperimenti pilota dovrebbero ottimizzare la concentrazione e la durata della stimolazione.
• Quando si utilizza questo anticorpo per il blocco funzionale o la deplezione, pre-incubare con la proteina ricombinante CD28 per confermare la specificità degli effetti osservati.
• Le strategie di gating per la citometria a flusso dovrebbero includere la discriminazione vivi/morti e controlli di isotipo appropriati per quantificare accuratamente l'espressione del CD28 sui sottogruppi di cellule T.
• Validare la reattività crociata nel proprio sistema sperimentale; si riferisce che l'anticorpo reagisce con il CD28 umano, ma il legamento off-target dovrebbe essere escluso nel contesto del campione pertinente.

CamelBio: Il tuo ponte di approvvigionamento tutto-in-uno

CamelBio semplifica l'approvvigionamento di materie prime IVD per produttori di diagnostica e laboratori di ricerca. Il nostro anticorpo monoclonale anti-CD28 esemplifica il nostro impegno nel fornire reagenti di alta qualità per la biologia delle cellule T e la ricerca in immuno-oncologia. Dalle coppie di anticorpi ottimizzate per saggi immuno-enzimatici a sandwich ai reagenti ausiliari in blocco, acceleriamo lo sviluppo dal concetto alla clinica.