Anticorpo monoclonale ABflo 488 coniugato, coniglio anti-umano CD301/CLEC10A per FC - Q8IUN9

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di CD301/CLEC10A

• CD301/CLEC10A funziona come recettore lectina di tipo C che riconosce specificamente i glicani terminanti in N-acetilgalattosammina (GalNAc) su glicoproteine e glicolipidi in modo dipendente da Ca²⁺, inclusi l'antigene Tn, l'antigene T e gli epitopi LacdiNAc. Riferimenti correlati:
  PMID:15802303 | PMID:16998493 | PMID:17616966 | PMID:23507963

• Agisce come recettore di segnalazione all'interfaccia delle interazioni APC-cellula T, downregolando l'attività della fosfatasi CD45 sulle cellule T effettrici e promuovendo la tolleranza delle cellule dendritiche, portando alla generazione di cellule T regolatorie CD4⁺ immunosoppressive. Riferimenti correlati:
  PMID:15802303 | PMID:16998493 | PMID:22213806

• Come recettore di riconoscimento di pattern endocitico, CD301/CLEC10A internalizza le mucine tumorali che portano l'antigene Tn e le consegna ai compartimenti endolisosomiali per la presentazione dell'antigene di classe I e II dell'MHC, contribuendo all'immunità antitumorale. Riferimenti correlati:
  PMID:15802303 | PMID:17616966 | PMID:17804752

• CD301/CLEC10A si localizza sulla membrana cellulare, sulla membrana dell'endosoma precoce e sulla membrana del lisosoma, in linea con i suoi ruoli nel legame del ligando, nell'internalizzazione e nell'elaborazione dell'antigene.

• La proteina è espressa prevalentemente nelle cellule presentanti l'antigene di origine mieloide, incluse le cellule dendritiche dermiche nei linfonodi e nella pelle.

• Lo splicing alternativo genera multiple isoforme di CD301/CLEC10A, contribuendo alla diversità funzionale; l'isoforma canonica ha una massa molecolare prevista di ~35 kDa, con bande aggiuntive osservate a 28 kDa e 32 kDa.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno (aa 61–316) comprende una porzione ampia del dominio extracellulare, incluso il dominio di riconoscimento dei carboidrati (CRD). Questo design probabilmente genera anticorpi che riconoscono CD301/CLEC10A nativo in citometria a flusso.

• La coniugazione ABflo 488 fornisce un marcatore fluorescente diretto per la colorazione in un singolo passaggio; includere sempre controlli isotipo appropriati e controlli "fluorescence-minus-one" (FMO) per confermare la specificità.

• Per la FC, ottimizzare le titolazioni dell'anticorpo utilizzando una linea cellulare rilevante o cellule dendritiche mieloidi primarie; un intervallo di concentrazione iniziale tipico è 0,5–5 µg per milione di cellule, ma questo dovrebbe essere determinato empiricamente.

• Poiché CD301/CLEC10A è espresso su DC mieloidi e macrofagi, considerare l'uso di PBMC o cellule dendritiche derivate da monociti per la validazione; verificare l'espressione mediante co-colorazione con marcatori di lignaggio (es. CD14, CD1c).

• L'anticorpo può anche essere adatto per rilevare cellule dendritiche infiltranti il tumore in campioni tumorali dissociati; validare i protocolli di fissazione e permeabilizzazione se è richiesta la colorazione intracellulare.

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