Coniglio anti-Umano CD326/EPCAM Anticorpo Monoclonale per IF/ICC e FC - P16422

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione della Molecola di Adesione Cellulare Epiteliale (EpCAM)

• EpCAM è una glicoproteina transmembrana di tipo I che funge da molecola di adesione cellulare omofilica, mediando interazioni fisiche tra le cellule epiteliali intestinali (IEC) e i linfociti intraepiteliali (IEL) per mantenere la barriera immunologica della mucosa.
• Gioca un ruolo critico nella proliferazione e differenziazione delle cellule staminali embrionali, con livelli di espressione che diminuiscono rapidamente upon differenziazione.
• EpCAM up-regola l'espressione di FABP5, MYC e delle ciclina A ed E, collegandolo alla regolazione del ciclo cellulare e al controllo della crescita.
• La proteina è localizzata alla membrana cellulare laterale e alle giunzioni strette, coerente con il suo ruolo nell'adesione cellula-cellula e nell'integrità epiteliale.
• Specificità tissutale: Altamente e selettivamente espressa nelle cellule staminali embrionali indifferenziate e in quasi tutte le membrane delle cellule epiteliali, ma assente dalle membrane delle cellule mesodermiche o neurali; frequentemente trovata sulla superficie degli adenocarcinomi.
• È un antigene tumorale ben caratterizzato ed è associato al cancro colorettale ereditario non poliposico.
• La proteina processata contiene un peptide segnale, un'elica transmembrana, legami disolfuro e siti di N-glicosilazione, con una massa molecolare calcolata di circa 34,9 kDa.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno comprende il dominio extracellulare (amminoacidi 24-265), che si prevede generi anticorpi che mirano a epitopi accessibili sulla superficie cellulare, adatti per la colorazione di cellule viventi o condizioni non permeabilizzate.
• Per immunofluorescenza (IF/ICC), considerare l'ottimizzazione dei protocolli di fissazione e permeabilizzazione basandosi sulla localizzazione del bersaglio alle membrane laterali e alle giunzioni strette; validare nelle linee cellulari epiteliali umane.
• In citometria a flusso (FC), utilizzare il formato coniugato diretto ; titolare l'anticorpo per ottenere un rapporto segnale-rumore ottimale e includere appropriati controlli isotipici.
• A causa della sola reattività crociata umana, verificare l'espressione del bersaglio nel modello cellulare o tissutale prima dell'uso.
• Il peso proteico è di circa 35 kDa; confermare con marcatori di peso molecolare e condizioni di blocco negli assay a valle.

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