Coniglio anti-Umano CD33 mAb per FC - P20138

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione del CD33

• Il CD33, noto anche come Siglec-3 (sialic acid-binding Ig-like lectin 3) o p67, è un recettore transmembrana appartenente alla superfamiglia delle immunoglobuline e alla famiglia Siglec di lectine leganti l'acido sialico. È espresso principalmente sulle cellule della linea mieloide.
• Il CD33 si lega preferenzialmente ai glicani che portano acido sialico con legami alfa-2,3 e alfa-2,6, mediando interazioni cellula-cellula e mantenendo le cellule immunitarie in uno stato di riposo. Il coinvolgimento del ligando innesca la fosforilazione dei suoi motivi inibitori recettoriali tirosinici citoplasmatici (ITIM) da parte di chinasi simili a Src come LCK, creando siti di ancoraggio per le protein-tirosine fosfatasi SHP-1 e SHP-2. Queste fosfatasi defosforilano quindi le molecole di segnalazione a valle per sopprimere l'attivazione cellulare. Riferimenti correlati: PMID:7718872, PMID:10887109, PMID:28325905, PMID:10206955, PMID:10556798, PMID:10611343, PMID:11320212
• La funzione inibitoria del CD33 sull'attivazione dei monociti richiede l'attività della fosfoinositide 3-chinasi (PI3K). Riferimenti correlati: PMID:15597323
• Il CD33 è localizzato alla membrana cellulare e ai perossisomi, come indicato da studi di frazionamento subcellulare e immunofluorescenza.
• La proteina è espressa prevalentemente sulle cellule della linea monocitica/mieloide; nel cervello, è espressa principalmente sulle cellule microgliali, dove è stata implicata nelle malattie neurodegenerative.
• Le modificazioni post-traduzionali includono glicosilazione N-legata, formazione di ponti disolfuro e fosforilazione dei residui tirosina ITIM. Lo splicing alternativo genera multiple isoforme.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno utilizzato per questo anticorpo corrisponde al dominio extracellulare (amminoacidi 18-259) del CD33 umano. Questa regione è esposta sulla superficie cellulare, rendendolo adatto per la citometria a flusso su cellule viventi senza permeabilizzazione.
• è un colorante fluorescente verde con massimi di eccitazione/emissione di circa 491/516 nm, compatibile con il canale FITC sulla maggior parte dei citometri a flusso. Assicurarsi di una corretta compensazione se utilizzato in pannelli multicolor.
• Per una colorazione ottimale, titolare l'anticorpo per determinare la concentrazione di lavoro per il proprio sistema sperimentale specifico. Includere appropriati controlli di isotipo e controlli FMO (fluorescenza meno uno) per impostare le soglie di gating.
• Poiché i livelli di espressione del CD33 possono variare con il tipo di cellula e lo stato di attivazione, validare l'anticorpo nella propria matrice di campioni (ad esempio, cellule mononucleari del sangue periferico, midollo osseo o linee cellulari).

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