Anticorpo monoclonale di coniglio anti-umano CD337/NKp30 per IF/ICC e FC (intra) - O14931

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di CD337/NKp30

• La proteina recettore 3 che attiva la citotossicità naturale (NCR3), nota anche come NKp30 o CD337, è un recettore presente sulle cellule NK e appartenente alla superfamiglia delle immunoglobuline. Esiste in più isoforme dovute allo splicing alternativo, con conseguenti pesi proteici compresi tra circa 16 e 21 kDa (osservati) e un peso molecolare teorico di circa 21,6 kDa.
• NCR3 agisce come recettore attivante sulle cellule natural killer (NK), stimolando la citotossicità in seguito al legame con ligandi extracellulari quali BAG6 e NCR3LG1.
• Il coinvolgimento di NCR3 da parte di BAG6 promuove la maturazione delle cellule dendritiche mieloidi (DC), sia attraverso l'eliminazione delle DC immature sia inducendo le cellule NK a rilasciare TNF-α e IFN-γ, che a loro volta promuovono la maturazione delle DC.
• Il recettore è espresso selettivamente da tutte le cellule NK quiescenti e attivate; una debole espressione è stata rilevata anche nella milza.
• A livello subcellulare, NCR3 è localizzato nella membrana cellulare, in accordo con il suo ruolo di recettore transmembrana.
• La proteina presenta un dominio immunoglobulinico, un peptide segnale, un'elica transmembrana e ponti disolfuro; è inoltre glicosilata. Tra le parole chiave di UniProt figurano splicing alternativo, glicoproteina e immunità.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• Poiché l'immunogeno corrisponde al dominio extracellulare (amminoacidi 19-135), l'anticorpo può rilevare NCR3 espresso sulla superficie senza permeabilizzazione. Per la citometria a flusso intracellulare è necessaria la permeabilizzazione; ottimizzare i protocolli di fissazione e permeabilizzazione per le linee cellulari NK.
• L'intervallo di peso proteico osservato (16–21 kDa) suggerisce la presenza di più isoforme o modifiche post-traduzionali; validare la specificità nel proprio sistema cellulare utilizzando controlli appropriati.
• Poiché NCR3 è espresso selettivamente sulle cellule NK, includere tipi cellulari di controllo (ad es., cellule T) per confermare la specificità negli esperimenti IF/ICC.
• Per IF/ICC, testare un intervallo di diluizioni dell'anticorpo su cellule fissate con paraformaldeide; il recupero antigenico può migliorare il segnale qualora si sospetti un mascheramento dell'epitopo.

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