Anticorpo monoclonale di coniglio anti-CD34 umano per FC - P28906

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di CD34

• CD34, noto anche come antigene CD34 delle cellule progenitrici ematopoietiche, è una proteina di membrana di tipo I a singolo passaggio appartenente alla famiglia CD34. Subisce splicing alternativo, dando origine a isoforme con pesi molecolari apparenti di circa 35 kDa e 41 kDa.
• Funziona come molecola di adesione cellulare, svolgendo un ruolo fondamentale nell'ematopoiesi precoce mediando l'adesione delle cellule staminali/progenitrici ematopoietiche alla matrice extracellulare del midollo osseo e alle cellule stromali.
• CD34 può agire come struttura di supporto che presenta glicani specifici della linea cellulare, consentendo alle cellule staminali di legarsi alle lectine espresse dalle cellule stromali o da altri componenti del midollo, regolando così la localizzazione e la ritenzione cellulare.
• Presenta ligandi carboidratici alle selectine, favorendo ulteriormente l'adesione e il traffico cellulare all'interno della nicchia ematopoietica.
• La proteina è espressa selettivamente sulla superficie delle cellule progenitrici ematopoietiche e sull'endotelio dei piccoli vasi di vari tessuti, rendendola un marcatore chiave per l'isolamento delle cellule staminali e gli studi di biologia vascolare.
• La localizzazione subcellulare è principalmente nella membrana plasmatica, in linea con il suo ruolo nelle interazioni cellula-cellula e cellula-matrice.
• Le modifiche post-traduzionali includono un'estesa glicosilazione N- e O-linked, la fosforilazione e la presenza di un peptide segnale e di un dominio transmembrana.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• Questo anticorpo è progettato per la citometria a flusso (FC) ed è direttamente coniugato ad , un fluoroforo eccitabile con laser violetto; non è necessario alcun reagente di rilevazione secondario, riducendo le fasi sperimentali e il background.
• L'immunogeno comprende gli amminoacidi 170–290 del CD34 umano (all'interno della regione extracellulare), suggerendo che l'anticorpo riconosca un epitopo extracellulare sulle cellule vive; si consiglia di manipolare le cellule delicatamente per preservare l'integrità dell'antigene di superficie.
• Per le applicazioni FC, titolare l'anticorpo per determinare la concentrazione ottimale per il proprio tipo cellulare e le proprie condizioni di colorazione, includendo controlli isotipici appropriati e controlli fluorescence minus one (FMO).
• Convalidare le prestazioni utilizzando cellule umane note come CD34-positive (ad es., le linee cellulari KG‑1a o MOLM‑13) o cellule progenitrici ematopoietiche primarie, valutando anche la co-colorazione con altri marcatori delle cellule staminali per analizzare le sottopopolazioni progenitrici.
• I pesi molecolari previsti di 35 kDa e 41 kDa possono corrispondere a isoforme diversamente glicosilate; queste informazioni possono essere utilizzate per confermare la specificità nel western blotting se l'anticorpo è convalidato per tale applicazione, ma la raccomandazione principale rimane la FC.

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