Anticorpo monoclonale coniglio anti-umano CD34 per IF/ICC e citometria a flusso - P28906

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di CD34

• L'antigene CD34 delle cellule progenitrici ematopoietiche, codificato dal gene CD34, è un marcatore consolidato per le cellule staminali e progenitrici ematopoietiche e contrassegna anche l'endotelio dei piccoli vasi.
• Lo splicing alternativo genera più isoforme: l'isoforma canonica ha un peso molecolare calcolato di circa 41 kDa (UniProt: 40716 Da), mentre una variante più corta di 35 kDa può derivare da processamenti post-traduzionali o differenze tra isoforme.
• CD34 è una glicoproteina transmembrana di tipo I a passaggio singolo che funziona probabilmente come molecola di adesione, mediando l'attaccamento delle cellule staminali alla matrice extracellulare del midollo osseo o alle cellule stromali durante l'ematopoiesi iniziale.
• PUò funzionare da impalcatura per glicani specifici per linea, presentando ligandi carboidrati alle selectine e facilitando le interazioni cellula-cellula.
• La localizzazione subcellulare è principalmente sulla membrana cellulare, coerente con il suo ruolo nell'adesione extracellulare e nella segnalazione.
• La proteina è soggetta a estese modifiche post-traduzionali, tra cui glicosilazione legata a N e O (glicoproteina) e fosforilazione, che possono regolarne la funzione e le proprietà di legame.
• L'espressione è altamente selettiva: CD34 si trova sulle cellule progenitrici ematopoietiche nel midollo osseo e nel sangue periferico, nonché sull'endotelio dei piccoli vasi in molti tessuti.
• La regione extracellulare (che include gli amminoacidi 170–290 usati come immunogeno) contiene più siti di glicosilazione ed è esposta sulla superficie cellulare, rendendola un bersaglio accessibile per la rilevazione basata su anticorpi.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione extracellulare (aa 170–290) di CD34 umano, e garantisce il riconoscimento dell'antigene nativo di superficie; questo anticorpo è validato per applicazioni IF/ICC e citometria a flusso.
• Per la colorazione all'immunofluorescenza, fissare e permeabilizzare le cellule in modo appropriato; se desiderato rilevare CD34 di superficie, valutare l'uso di un protocollo senza permeabilizzazione.
• In citometria a flusso, includere appropriati controlli di isotipo e passaggi di blocco dei recettori Fc per ridurre al minimo il legame non specifico; titolare l'anticorpo per determinare la concentrazione ottimale per il vostro sistema cellulare.
• L'espressione di CD34 è limitata a tipi cellulari specifici; usare controlli positivi ben caratterizzati (ad es. cellule KG-1a, HUVEC o progenitori ematopoietici CD34+) e controlli negativi (ad es. linfociti, cellule del sangue mature) per confermare la specificità.
• Sebbene questo coniugato sia progettato per IF/ICC e FC, se si esplorano altre applicazioni (ad es. IHC, WB), validare l'anticorpo in queste condizioni e considerare potenziali differenze nella conformazione dell'antigene.

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