Anticorpo monoclonale coniugato di coniglio anti-CD370/CLEC9A umano per Citometria a Flusso - Q6UXN8

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di CD370/CLEC9A

• Identità proteica e alias: CD370, noto anche come C-type lectin domain family 9 member A (CLEC9A), DNGR-1 e UNQ9341, è codificato dal gene CLEC9A nell'uomo.
• Funzione principale come recettore endocitico: CLEC9A funziona come recettore endocitico su un piccolo sottoinsieme di cellule mieloidi, specializzato per l'assorbimento e l'elaborazione di materiale proveniente da cellule morte. Media la cross-presentazione di antigeni associati a cellule morte in modo dipendente da Syk.
• Meccanismo di riconoscimento del ligando: Il recettore riconosce la forma filamentosa dell'actina (F-actina) in associazione con particolari domini leganti l'actina delle proteine del citoscheletro, inclusa la spectrina, che vengono esposti in seguito a danni della membrana cellulare.
• Espressione tissutale e cellulare: La sua espressione è altamente ristretta nel sangue periferico alla superficie delle cellule dendritiche BDCA3+ e su un piccolo sottoinsieme di monociti CD14+ e CD16−.
• Localizzazione subcellulare: CLEC9A è una proteina di membrana, coerente con il suo ruolo di recettore di superficie cellulare. Contiene un'elica transmembrana a singolo passaggio e una sequenza segnale-ancora, classificandola come proteina di membrana di tipo II.
• Caratteristiche strutturali e funzionali: La proteina appartiene alla famiglia delle lectine di tipo C e contiene legami disolfuro e siti di glicosilazione N-legati, caratteristici dei recettori di membrana coinvolti nell'endocitosi. Il suo peso molecolare è di circa 27 kDa.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno comprende gli amminoacidi 110–241 del dominio extracellulare (NP_997228.1), che contiene il dominio di riconoscimento dei carboidrati. È probabile che questa regione sia accessibile su cellule vive, supportandone l'uso in citometria a flusso.
• Per la citometria a flusso, titolare l'anticorpo per determinare la concentrazione ottimale per il proprio tipo cellulare specifico. Includere un controllo isotipo appropriato e considerare l'uso di un reagente di blocco del recettore Fc per ridurre il legame aspecifico.
• Poiché CLEC9A è un recettore endocitico, il legame dell'anticorpo potrebbe innescare l'internalizzazione. Per minimizzare la potenziale internalizzazione, eseguire le fasi di colorazione a 4°C in presenza di azoturo di sodio, se possibile.
• Convalidare l'anticorpo su un campione positivo noto, come cellule dendritiche BDCA3+ o monociti CD14+, per confermarne la specificità. Il pattern di espressione ristretto lo rende un marcatore utile per studi di immunofenotipizzazione.

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