Anticorpo Monoclonale di Coniglio anti-CD59 Umano per Citometria a Flusso - P13987

Specifiche e Parametri Fondamentali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione del CD59

• La glicoproteina CD59, nota anche come protectina, proteina inibitrice del MAC (MAC-IP), inibitore di membrana della lisi reattiva (MIRL) o HRF-20, è un regolatore chiave del sistema del complemento.
• Il CD59 è un potente inibitore del complesso di attacco alla membrana (MAC) del complemento e protegge le cellule umane dalla lisi mediata dal complemento. Si lega alle strutture beta-hairpin di C8 (C8A e C8B) nel MAC in assemblaggio, formando un foglio beta intermolecolare che impedisce l'incorporazione di multiple copie di C9 necessarie per la formazione completa del poro osmolico. Riferimenti correlati: PMID:11882685, PMID:1698710, PMID:2475111, PMID:36797260
• La forma solubile del CD59, presente nelle urine, conserva l'attività di legame specifica per il complemento ma mostra una capacità notevolmente ridotta di inibire l'assemblaggio del MAC sulle membrane cellulari.
• Il CD59 è localizzato principalmente sulla membrana cellulare tramite un ancoraggio glicosilfosfatidilinositolo (GPI) ma può anche essere secreto.
• Le modificazioni post-traduzionali includono N-glicosilazione, formazione di legami disolfuro e glicazione, che contribuiscono alla sua stabilità strutturale e funzione.
• Mutazioni nel gene CD59 sono associate ad anemia emolitica ereditaria.
• Lo splicing alternativo del gene CD59 genera diverse isoforme.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione extracellulare N-terminale del CD59 (aa 26–101), che è esposta sulla superficie cellulare; il coniugato è adatto per la rilevazione diretta del CD59 nativo mediante citometria a flusso senza la necessità di un anticorpo secondario.
• Per la citometria a flusso, titolare l'anticorpo per determinare la concentrazione ottimale di colorazione per il proprio tipo cellulare specifico; un eccesso di anticorpo può aumentare il fondo.
• Includere appropriati controlli isotipo e coloranti di vitalità per distinguere la colorazione specifica di membrana dal legame aspecifico alle cellule morte.
• L'espressione di CD59 può variare tra i tipi cellulari e gli stati di attivazione; validare la colorazione nel sistema biologico rilevante (ad es. cellule mononucleate del sangue periferico, linee cellulari tumorali) e considerare la co-colorazione con altri marcatori regolatori del complemento.

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