Anticorpo monoclonale di coniglio anti-CD59 umano per citofluorimetria - P13987

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione del CD59

• Il CD59, noto anche come protectina, proteina inibitrice del MAC (MAC-IP), inibitore di membrana della lisi reattiva (MIRL) e HRF-20, è una glicoproteina ancorata al GPI espressa sulle cellule umane.
• Funziona come un potente inibitore del complesso di attacco alla membrana del complemento (MAC), prevenendo i danni alle cellule ospiti bloccando l'incorporazione di molteplici molecole di C9 nel poro (PubMed:11882685, PubMed:1698710, PubMed:2475111, PubMed:36797260).
• Riferimenti correlati: PMID:11882685 PMID:1698710 PMID:2475111 PMID:36797260
• Una forma solubile del CD59 è presente nelle urine; mantiene l'attività di legame al complemento, ma ha una capacità significativamente ridotta di inibire l'assemblaggio del MAC sulle membrane cellulari.
• Il CD59 è localizzato sulla membrana cellulare tramite un'ancora di glicosilfosfatidilinositolo (GPI); viene anche secreto.
• Le mutazioni nel gene CD59 sono associate all'anemia emolitica ereditaria, sottolineando il suo ruolo essenziale nella protezione degli eritrociti dalla lisi mediata dal complemento.
• La proteina è soggetta a splicing alternativo e a modifiche post-traduzionali, tra cui la formazione di ponti disolfuro, la glicazione e l'aggiunta dell'ancora GPI.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno utilizzato corrisponde agli amminoacidi 26-101 del CD59 umano, una regione fondamentale per la sua interazione con i componenti del complemento C8 e C9. Si consiglia di utilizzare cellule integre e vive per la colorazione della superficie, data la presenza dell'ancora GPI extracellulare.
• Per la citofluorimetria, le concentrazioni ottimali dell'anticorpo devono essere determinate empiricamente. Un intervallo di diluizione iniziale suggerito è 1:50–1:200. Includere controlli isotipici appropriati e controlli di compensazione quando si utilizzano più fluorofori.
• Questo anticorpo è coniugato con , eccitato dal laser violetto a 405 nm e rilevato con un filtro passa-banda da 450/50 nm. Assicurarsi che la configurazione del citometro sia compatibile.

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