Anticorpo Monoclonale Coniglio anti-Uomo CD61 per Citometria a Flusso - P05106

Specifiche e Parametri Fondamentali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione dell'Integrina beta-3 (CD61)

• L'integrina beta-3 (CD61, GPIIIa) è codificata dal gene ITGB3 ed espressa come glicoproteina transmembrana di tipo I. Lo splicing alternativo produce l'isoforma beta-3A (ampiamente espressa, tra cui piastrine e osteoblasti) e l'isoforma beta-3C (specifico per prostata e testicolo).
• Forma due eterodimeri principali: l'αIIbβ3 (ITGA2B:ITGB3) specifico piastrinico, che media l'aggregazione piastrinica legando il fibrinogeno dopo attivazione, e l'αVβ3 (ITGAV:ITGB3) ampiamente espresso, che agisce come recettore per vitronectina, fibronectina, osteopontina e altre proteine della matrice extracellulare.
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• L'integrina αVβ3 trasmette segnali da fattori di crescita (FGF1, FGF2, IGF1, IGF2, IL1B) e proteine della matrice, regolando l'angiogenesi, la migrazione cellulare e la sopravvivenza.
  Riferimenti correlati: PMID:18441324, PMID:28302677, PMID:19578119, PMID:28873464, PMID:29030430
• Nel sistema nervoso centrale, l'integrina beta-3 modula la forza sinaptica regolando la localizzazione del trasportatore della serotonina e l'endocitosi del recettore AMPA (per similarità).
• ITGAV:ITGB3 funziona come recettore di ingresso per diversi virus, tra cui l'herpesvirus umano 8, il coxsackievirus A9, l'hantavirus, il citomegalovirus, il metapneumovirus umano, il parechovirus umano 1 e il virus del Nilo occidentale; la proteina Tat dell'HIV-1 interagisce anche con αVβ3 per promuovere l'angiogenesi nel sarcoma di Kaposi.
• Subcellularmente, l'integrina beta-3 si localizza sulla membrana cellulare, sulla membrana del lamellipodio, nelle adesioni focali e sulle membrane postsinaptiche, riflettendo i suoi ruoli nell'adesione, nella migrazione e nell'organizzazione sinaptica.
• Le modifiche post-traduzionali includono legami disolfuro, multipli siti di N-glicosilazione e fosforilazione; lega ioni calcio e magnesio essenziali per l'attività di legame con il ligando.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Questo anticorpo è stato ottenuto contro una proteina ricombinante che copre gli amminoacidi 21–718 di CD61 umano, che comprende l'intero dominio extracellulare. È previsto che riconosca l'integrina beta-3 nativa sulla superficie cellulare.
• La coniugazione diretta con permette una colorazione in un solo passaggio senza anticorpi secondari; pertanto, includi appropriati controlli isotipici e passaggi di blocco dei recettori Fc per minimizzare il legame non specifico.
• Per la citometria a flusso, titra l'anticorpo per determinare la concentrazione ottimale per il tuo specifico tipo cellulare e le condizioni sperimentali; le diluizioni iniziali tipiche variano da 1:25 a 1:200, ma le prestazioni effettive devono essere convalidate empiricamente.
• I protocolli di fissazione e permeabilizzazione devono essere testati, poiché possono alterare l'accessibilità dell'epitopo. Per la massima sensibilità si raccomanda la colorazione di superficie di cellule vive non fissate.
• L'espressione dell'integrina beta-3 può essere upregolata dopo l'attivazione piastrinica; considera le condizioni di riposo vs. attivazione nella progettazione del tuo esperimento.

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