Anticorpo monoclonale coniglio anti-umano CD66a/CEACAM1 per FC - P13688

Specifiche e parametri principali del prodotto

Background biologico: Funzione e localizzazione di CEACAM1

• CEACAM1 (conosciuto anche come BGP-1, CD66a) è una molecola di adesione cellulare appartenente alla famiglia dell'antigene carcinoembryonico (CEA), codificata dal gene CEACAM1 (GeneID: 634) sul cromosoma 19.
• Funge da molecola di adesione cellulare omofila indipendente dal calcio e da recettore coinibitorio chiave nelle risposte immunitarie, regolando negativamente la citotossicità mediata dal recettore delle cellule T, la proliferazione e la produzione di citochine, nonché la citolisi delle cellule NK e l'attivazione dei neutrofili. Riferimenti correlati: PMID:18424730 PMID:23696226 PMID:25363763
• La proteina è coinvolta nella segnalazione dell'insulina promuovendo la clearance insulinica e regolando la lipogenesi, e agisce come attivatore nell'angiogenesi, potenziando la differenziazione delle cellule endoteliali e il rimodellamento vascolare.
• L'mRNA splicing alternativo genera più isoforme; le isoforme predominanti nelle cellule T hanno un dominio citoplasmatico lungo essenziale per la segnalazione, mentre i leucociti esprimono principalmente le isoforme 1 e 6.
• CEACAM1 si localizza in vari domini della membrana cellulare (apicale, basolaterale, laterale), nelle giunzioni aderenti, sulle microvilli e sulle membrane delle vescicole secretorie; viene prodotta anche una forma secreta.
• È una fosfoproteina altamente glicosilata con domini simili alle immunoglobuline e legami disolfuro; la sua fosforilazione è fondamentale per reclutare fosfatasi come PTPN6 (SHP-1) e mediare la segnalazione inibitoria.
• L'espressione tissutale è prominente nelle cellule epiteliali colonnari del colon, nei granulociti e nei linfociti; nelle cellule T, l'espressione è upregolata in seguito all'attivazione.
• CEACAM1 svolge anche ruoli nell'inibizione dell'aggregazione piastrinica, nella soppressione della migrazione cellulare tramite interazione con FLNA e nel trasporto degli acidi biliari. Riferimenti correlati: PMID:16291724

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• Il coniugato è ottimizzato per la citometria a flusso; comunemente si utilizza una titolazione iniziale di 0,5–5 µL per test (1×10^6 cellule), ma la diluizione ottimale deve essere determinata empiricamente.
• L'immunogeno (amminoacidi 35–428) corrisponde al dominio extracellulare, quindi questo anticorpo è adatto per la colorazione superficiale di cellule vive non fissate.
• Celle mononucleate del sangue periferico umano (PBMC), linee di cellule T (ad es. Jurkat) o linee di adenocarcinoma colorettale (ad es. HT-29) che esprimono CEACAM1 possono essere utilizzate come controlli positivi appropriati.
• Includere un controllo di isotipo appropriato coniugato allo stesso fluoroforo per valutare il legame non specifico.
• Si consiglia il blocco dei recettori Fc quando si colorano cellule con elevata espressione di FcγR (ad es. monociti, macrofagi) per ridurre il segnale di fondo.
• Per pannelli multicolore, confermare la minima sovrapposizione spettrale con utilizzando controlli di compensazione.

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