Anticorpo monoclonale coniugato con coniglio anti-CD68 umano per citometria a flusso (intracellulare) - P34810

Specifiche e parametri principali del prodotto

Background Biologico: Funzione e Localizzazione di CD68 (Macrosialina)

• Lo splicing alternativo produce molteplici isoforme di CD68. Il CD68 è una proteina transmembrana altamente glicosilata appartenente alla famiglia delle glicoproteine di membrana associate ai lisosomi/endosomi (LAMP).
• Il CD68 svolge un ruolo chiave nelle attività fagocitiche dei macrofagi tissutali, sia nel metabolismo lisosomiale intracellulare che nelle interazioni cellula-cellula e cellula-patogeno extracellulari.
• Si lega a lectine o selectine specifiche per tessuti e organi, facilitando il "homing" di sottopopolazioni di macrofagi a tessuti particolari.
• La rapida ricircolazione del CD68 dagli endosomi e lisosomi alla membrana plasmatica può consentire ai macrofagi di migrare su substrati o altre cellule che esprimono selectine.
• A livello subcellulare, il CD68 si localizza principalmente sulle membrane degli endosomi e dei lisosomi, ma può essere trovato anche sulla membrana cellulare.
• È altamente espresso nei monociti del sangue e nei macrofagi tissutali, ed è rilevato anche in linfociti, fibroblasti, cellule endoteliali e molte linee cellulari tumorali, dove può favorire la disseminazione.
• La proteina contiene un peptide segnale, un dominio transmembrana e diversi ponti disolfuro, e subisce glicosilazione N-legata.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Poiché il CD68 si trova principalmente nei compartimenti lisosomiali ed endosomiali intracellulari, eseguire appropriati passaggi di fissazione e permeabilizzazione prima della colorazione per la citometria a flusso intracellulare.
• Convalidare le prestazioni dell'anticorpo in sistemi modello di macrofagi rilevanti, come macrofagi derivati da THP-1 o monociti umani primari.
• Il fluoroforo ha eccitazione/emissione simile al Pacific Blue, quindi assicurarsi che il citofluorimetro sia configurato con un laser violetto (ad es. 405 nm) e filtri di rilevamento appropriati (ad es. 450/50 BP).
• Questo anticorpo è stato generato contro il dominio extracellulare/luminale (aa 22-319) del CD68 umano, che può riconoscere sia il pool proteico di superficie che quello intracellulare.

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