Coniglio anti-Umano CD84 Anticorpo Monoclonale per IF/ICC e FC - Q9UIB8

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione del CD84

• Il CD84 (SLAMF5) è unembro della famiglia di recettori SLAM, che modulano sia le risposte immunitarie innate che adattative attraverso interazioni cellula-cellula omotipiche o eterotipiche.
• Funziona come recettore auto-ligante e la sua segnalazione è regolata dalla presenza di piccole proteine adattatrici citoplasmatiche SH2D1A/SAP e SH2D1B/EAT-2.
• Le interazioni omofile del CD84 potenziano la secrezione di interferone gamma (IFNG) nei linfociti e inducono l'attivazione delle piastrine tramite una via dipendente da SH2D1A.
• Il CD84 media la citotossicità delle cellule natural killer (NK), dipendente da SH2D1A e SH2D1B (Per similarità).
• Serve come marcatore per le cellule progenitrici ematopoietiche. Riferimenti correlati: PMID:11564780, PMID:12115647, PMID:12928397
• Nelle cellule mastocitarie, il CD84 regola negativamente la segnalazione del recettore delle immunoglobuline epsilon ad alta affinità, indipendentemente da SH2D1A e SH2D1B, coinvolgendo FES e PTPN6/SHP-1. Riferimenti correlati: PMID:22068234
• Il CD84 regola positivamente la macroautofagia nelle cellule dendritiche primarie stabilizzando IRF8, inibendo il suo degrado proteasomico mediato da TRIM21. Riferimenti correlati: PMID:29434592
• Localizzazione subcellulare: il CD84 è una proteina della membrana cellulare espressa prevalentemente nei tessuti ematopoietici, inclusi linfonodi, milza, leucociti periferici, macrofagi, cellule B, monociti, piastrine, timociti, cellule T e cellule dendritiche.
• La proteina subisce splicing alternativo, portando a multiple isoforme con pesi molecolari previsti intorno a 24-38 kDa. È una glicoproteina con legami disolfuro e siti di fosforilazione.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Utilizzare direttamente per citometria a flusso (FC) o immunofluorescenza/immunocitochimica (IF/ICC) senza anticorpo secondario, poiché l'anticorpo è pre-coniugato ad .
• Titolare l'anticorpo per determinare la concentrazione ottimale per il proprio specifico setup sperimentale; le diluizioni iniziali tipiche per la FC sono 1:50-1:200, ma confermare empiricamente.
• Per la FC, includere un controllo isotopico appropriato (IgG1 di coniglio ) per valutare il legame non specifico.
• Per IF/ICC, si raccomanda la fissazione con paraformaldeide al 4%; la permeabilizzazione potrebbe non essere necessaria per il CD84 di superficie cellulare, ma testare se si desidera una colorazione intracellulare.
• Validare l'anticorpo in linee cellulari ematopoietiche umane o cellule immunitarie primarie note per esprimere il CD84 (es. Raji, THP-1 o PBMC).
• Poiché l'anticorpo rileva multiple isoforme, notare che l'intensità della colorazione può variare tra i tipi cellulari a causa dell'espressione differenziale delle isoforme.
• Evitare cicli ripetuti di congelamento-scongelamento; conservare a 4°C al riparo dalla luce.

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