Anticorpo monoclonale di coniglio anti-CD94 umano per FC - Q13241

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di CD94 (KLRD1)

• CD94 (KLRD1) funge da subunità di legame al ligando e si associa a KLRC1 o KLRC2 per formare recettori immunitari eterodimerici. Questi complessi riconoscono la molecola MHC di classe Ib non classica HLA-E che presenta peptidi self, consentendo ai linfociti citotossici di monitorare l'espressione dell'MHC di classe I e mantenere la tolleranza verso il self. Riferimenti correlati: PMID:10023772, PMID:18064301, PMID:18083576, PMID:12387742, PMID:9430220

• Il complesso KLRD1-KLRC1 agisce come recettore inibitorio, in particolare sulle cellule NK e sulle cellule T CD8+ della memoria/effettrici. Trasmette il segnale attraverso gli ITIM, reclutando le fosfatasi SHIP-1 e SHIP-2 per attenuare i segnali di attivazione. Nei microambienti tumorali, questa via può favorire l'esaurimento linfocitario, costituendo un checkpoint immunitario. Riferimenti correlati: PMID:30860984, PMID:9485206, PMID:12165520, PMID:30503213, PMID:12387742, PMID:18064301

• Al contrario, il recettore KLRD1-KLRC2 media l'attivazione quando si lega a HLA-E caricato con peptidi derivati da HLA-G. Si associa all'adattatore TYROBP/DAP12 e promuove le funzioni effettrici nelle cellule NK adattative, contribuendo alla tolleranza materno-fetale. Riferimenti correlati: PMID:15940674, PMID:9655483, PMID:30134159, PMID:9754572, PMID:20952657, PMID:21825173

• CD94 è una glicoproteina transmembrana localizzata sulla superficie cellulare, con espressione arricchita nelle cellule NK e in sottopopolazioni di cellule T CD8+ αβ e γδ. L'espressione differenziale dei complessi inibitori e attivatori definisce popolazioni linfocitarie funzionalmente distinte.

• Le modifiche post-traduzionali includono la glicosilazione e la formazione di ponti disolfuro, mentre lo splicing alternativo genera isoforme.

• Diversi virus sfruttano le interazioni CD94–HLA-E per evadere la risposta immunitaria. Il citomegalovirus umano e HIV-1 producono peptidi che stabilizzano HLA-E, mentre SARS-CoV-2 può indurre l'esaurimento delle cellule NK e T attraverso questo asse. Riferimenti correlati: PMID:32859121

Linee guida sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è la proteina ricombinante CD94 umana a lunghezza intera, che può supportare il riconoscimento degli epitopi nativi nella citometria a flusso. Validare la specificità dell'anticorpo utilizzando linee cellulari CD94-negative o knockout.
• Per una colorazione ottimale nella citometria a flusso, titolare l'anticorpo per ciascun tipo cellulare e includere appropriati controlli isotipici. Eseguire il blocco dei recettori Fc quando si lavora con campioni che esprimono FcR.
• Considerare attentamente i protocolli di fissazione e permeabilizzazione; la colorazione della superficie è tipica per la citometria a flusso su cellule vive, mentre la rilevazione intracellulare può richiedere un'ulteriore ottimizzazione.
• In caso di doppia colorazione con altri anticorpi fluorescenti, verificare la sovrapposizione spettrale e le impostazioni di compensazione, poiché è compatibile con le comuni linee laser (ad es. 633/635 nm).

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