Anticorpo Monoclonale Rabbit anti-Umano CD94 per Citometria a Flusso - Q13241

Specifiche e Parametri Fondamentali del Prodotto

Background Biologico: Funzione e Localizzazione di CD94

• CD94 (KLRD1) è una glicoproteina transmembrana di tipo II appartenente alla sottofamiglia D dei recettori simili alle lectine delle cellule killer. Funge da subunità legante ligando, formando eterodimeri legati da ponti disolfuro con NKG2A (KLRC1) o NKG2C (KLRC2). Questi complessi recettoriali riconoscono la molecola non classica MHC di classe Ib HLA-E sulle cellule bersaglio, consentendo la sorveglianza immunitaria dell'espressione MHC di classe I. Riferimenti correlati: PMID:10023772, PMID:18064301, PMID:18083576, PMID:12387742, PMID:9430220
• Il complesso KLRD1-KLRC1 agisce come recettore inibitorio dominante sulle cellule natural killer (NK) e su un sottoinsieme di cellule T CD8+ memoria/effettori. Dopo il legame con HLA-E, recluta le fosfatasi tirosiniche INPP5D/SHIP-1 e INPPL1/SHIP-2 tramite motivi di inibizione a base tirosinica dei recettori immunorecettori (ITIM) presenti in KLRC1, contrastando i segnali di attivazione e mantenendo l'autotolleranza. Nel microambiente tumorale, questa via contribuisce all'esaurimento delle cellule NK e T. Riferimenti correlati: PMID:30860984, PMID:9430220, PMID:9485206, PMID:12387742, PMID:18064301, PMID:30503213, PMID:12165520
• Il complesso KLRD1-KLRC2 funziona come recettore attivante, trasmette segnali tramite l'adattatore TYROBP/DAP12. Svolge ruoli nelle risposte adattive delle cellule NK, nell'immunità virale e nella tolleranza materno-fetale riconoscendo HLA-E caricato con peptidi da HLA-G o antigeni virali. Riferimenti correlati: PMID:15940674, PMID:9655483, PMID:30134159, PMID:9754572, PMID:20952657, PMID:21825173
• I recettori CD94 sono sfruttati dai virus per l'evasione immunitaria: il citomegalovirus umano stabilizza HLA-E con peptidi virali per inibire le cellule NK; l'HIV-1 utilizza un peptide derivato da p24 (AISPRTLNA) per lo stesso scopo; e la proteina spike S1 del SARS-CoV-2 (peptide LQPRTFLL) induce l'esaurimento delle cellule NK e CD8+ T tramite il riconoscimento di HLA-E. Riferimenti correlati: PMID:32859121
• CD94 è espresso sulla membrana cellulare di sottoinsiemi di cellule NK, cellule T αβ CD8+ memoria/effettori, cellule T γδ citotossiche e cloni di cellule T specifici per il melanoma. KLRD1-KLRC1 e KLRD1-KLRC2 sono distribuiti in modo differenziale, con poche cellule che coesprimono entrambi i complessi. Riferimenti correlati: PMID:21825173, PMID:9430220, PMID:9485206, PMID:12387742, PMID:20952657
• Strutturalmente, CD94 contiene un dominio simile alla lectina di tipo C, un'ancora di segnale e una singola elica transmembrana. È modificato post-traduzionalmente da glicosilazione N-linked e formazione di ponti disolfuro, essenziali per il corretto ripiegamento e la dimerizzazione. Il suo peso molecolare è di circa 21 kDa.

Indicazioni Sperimentali e Consigli Tecnici

• è un fluoroforo luminoso con massimi di eccitazione/emissione adatti per laser blu (488 nm) o rossi (633 nm); verificare la compatibilità con la configurazione del vostro citometro a flusso e le impostazioni di compensazione.
• Essendo un coniugato diretto, l'anticorpo non richiede colorazione secondaria. Effettuare una titolazione per determinare la concentrazione ottimale per il vostro tipo di cellula e le condizioni sperimentali.
• Validare in un sistema che esprime CD94 noto come la linea cellulare di cellule NK NKL o cellule NK umane appena isolate. Includere sia controlli positivi (ad esempio, cellule NK attivate con IL-2) che controlli negativi (ad esempio, linee cellulari CD94–).
• L'espressione di CD94 può variare in base allo stato di attivazione cellulare; considerare esperimenti di corso temporale o di stimolazione per catturare i cambiamenti dinamici.
• Per pannelli multicolore, verificare la sovrapposizione spettrale con altri fluorofori e utilizzare controlli di compensazione appropriati.

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