Rabbit anti-Human CD97 mAb per FC - P48960

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione del CD97

• Il recettore accoppiato a proteine G di adesione E5 (CD97, ADGRE5) è un membro della famiglia dei recettori accoppiati a proteine G di adesione (GPCR), caratterizzato da un grande dominio extracellulare con ripetizioni simili all'EGF e un dominio a sette transmembrana.
• La proteina media sia l'adesione cellulare che la segnalazione intracellulare, funzionando principalmente subito dopo l'attivazione dei leucociti per regolare la migrazione.
• Il CD97 svolge un ruolo essenziale nella migrazione dei leucociti, facilitando il traffico delle cellule immunitarie verso i siti di infiammazione.
• È ampiamente espresso sulla maggior parte delle cellule ematopoietiche, inclusi linfociti attivati, monociti, macrofagi, cellule dendritiche e granulociti, ed è anche abbondante sulle cellule muscolari lisce.
• Il recettore è localizzato sulla membrana cellulare e può anche essere rilasciato in forma solubile nello spazio extracellulare; la sua espressione è up-regolata in condizioni infiammatorie, come nella sclerosi multipla e nell'artrite reumatoide.
• Il CD97 è espresso in vari carcinomi (tiroideo, colorettale, gastrico, esofageo, pancreatico), suggerendo potenziali ruoti nella biologia tumorale.
• Le modifiche post-traduzionali includono glicosilazione e fosforilazione; la proteina contiene domini simili all'EGF leganti il calcio e legami disolfuro critici per la sua struttura.
• Lo splicing alternativo produce isoforme con diversi pesi molecolari; le masse annotate su UniProt sono circa 92 kDa, riflettendo le forme glicosilate.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è stato progettato utilizzando la regione extracellulare (aa 21-398) del CD97 umano, che comprende i domini simili all'EGF ed è probabile che riconosca il recettore nativo espresso sulla superficie in citometria a flusso.
• Per la citometria a flusso (FC), considerare l'uso di un'adeguata discriminazione vivo/morto e del blocco dei recettori Fc per minimizzare il legame aspecifico, specialmente in campioni con alta espressione di FcγR come monociti e macrofagi.
• Validare l'anticorpo nel sistema di campione pertinente (es. PBMC umani, linee cellulari che esprimono CD97) e includere i controlli appropriati per confermare la specificità.
• Poiché il CD97 viene rilasciato e presente in forma solubile, tenere presente che il CD97 solubile nel campione (es. siero, liquido sinoviale) potrebbe competere con il rilevamento legato alla membrana; considerare un lavaggio accurato delle cellule prima della colorazione.

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