Conio anticorpo monoclonale anti-CD97 umano () per Citometria a flusso - P48960

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione del CD97

• Il CD97, anche designato ADGRE5 o TM7LN1, appartiene alla sottfamiglia dei recettori accoppiati a proteine G di adesione e presenta domini extracellulari multipli simili all'EGF con legame al calcio.
• Media sia l'adesione cellulare che la segnalazione intracellulare, con un ruolo ben consolidato nella promozione della migrazione dei leucociti.
• Lo splicing alternativo genera almeno tre isoforme che differiscono nel numero di ripetizioni simili all'EGF, dando origine a bande proteiche che migrano a circa 81 kDa, 86 kDa e 91 kDa su SDS-PAGE.
• Il recettore è prevalentemente localizzato sulla membrana cellulare; forme solubili possono essere rilasciate nello spazio extracellulare a seguito di clivaggio proteolitico.
• Il CD97 è ampiamente espresso attraverso le linee ematopoietiche—inclusi i linfociti T attivati, i linfociti B, i monociti, i macrofagi, le cellule dendritiche e i granulociti—ed è anche abbondante sulle cellule muscolari lisce.
• La sua espressione è marcatamente upregolata in microambienti infiammatori (es. sinovia nell'artrite reumatoide, lesioni nella sclerosi multipla) e in diversi carcinomi (tiroideo, colorettale, gastrico, esofageo, pancreatico).
• La proteina contiene numerosi legami disolfuro e subisce fosforilazione e glicosilazione; queste modifiche influenzano la sua stabilità e le interazioni con i ligandi.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno copre gli amminoacidi 21–398 del CD97 umano, corrispondenti alla regione extracellulare, rendendo questo coniugato ben adatto per rilevare il CD97 di superficie sulle cellule viventi senza permeabilizzazione.
• Ottimizzare la diluizione dell'anticorpo mediante titolazione sulla popolazione cellulare target, poiché i livelli di espressione del CD97 possono variare ampiamente tra i tipi cellulari e gli stati di attivazione.
• Dato che il CD97 può essere rilasciato (shed) dalla membrana plasmatica, minimizzare la manipolazione delle cellule ed evitare incubazioni prolungate a 37°C per mantenere l'integrità dell'antigene di superficie.
• Per pannelli di citometria a flusso multicolore, confermare che il fluoroforo non mostri una sovrapposizione inaccettabile con altri canali utilizzati nel vostro esperimento.

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