Anticorpo monoclonale di coniglio anti-CD99 umano per IF/ICC e FC - P14209

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione dell'antigene CD99

• L'antigene CD99 (noto anche come MIC2, antigene E2, 12E7 o glicoproteina di superficie delle cellule T E2) è una proteina transmembrana codificata dal gene CD99 nell'uomo.
• Svolge una funzione nei processi di adesione delle cellule T, inclusa la formazione spontanea di rosette con gli eritrociti, una caratteristica delle cellule T.
• CD99 svolge un ruolo critico nella diapedesi leucocitaria, facilitando il passaggio dei leucociti attraverso la membrana basale endoteliale in una fase avanzata, indipendentemente da PECAM1.
• La proteina è localizzata nella membrana plasmatica (proteina di membrana di tipo I a singolo passaggio), con l'estremità N-terminale esposta extracellularmente.
• Le modifiche post-traduzionali includono glicosilazione e fosforilazione (parole chiave: glicoproteina, fosfoproteina).
• Lo splicing alternativo genera molteplici isoforme e la proteina fa parte del proteoma di riferimento, con evidenze dirette di sequenziamento proteico.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico che comprende gli amminoacidi 24-123 di CD99 umano, corrispondenti alla regione extracellulare N-terminale. Questo design è probabilmente diretto verso un epitopo esposto, adatto alle applicazioni di colorazione di cellule vive.
• Per l'immunofluorescenza (IF/ICC), si raccomanda la fissazione con paraformaldeide, ma la permeabilizzazione può essere omessa se l'epitopo è accessibile sulla superficie cellulare. Eseguire test di colorazione con e senza detergente per confermare.
• Nella citometria a flusso (FC), questo coniugato consente il rilevamento diretto; valutare l'utilizzo di controlli isotipici appropriati e titolare l'anticorpo per ottenere un rapporto segnale/rumore ottimale.
• Validare la specificità dell'anticorpo nel proprio sistema sperimentale utilizzando linee cellulari CD99-positive (ad es. linee di cellule T) e controlli CD99-negativi, per confermare una reattività crociata minima.
• Poiché CD99 è coinvolto nell'adesione, assicurarsi che i metodi di raccolta cellulare non danneggino gli antigeni di superficie; si consigliano tecniche di distacco delicate.

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