Anticorpo Monoclonale Conigliato anti-CLEC12A/CD371 Umano per FC - Q5QGZ9

Specifiche e Parametri Fondamentali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di CLEC12A

• CLEC12A (CD371, CLL-1, MICL) è un recettore transmembrana di tipo II a passaggio singolo della famiglia delle lectine di tipo C. Lo splicing alternativo genera multiple isoforme.
• Funge da recettore inibitorio mieloide; dopo il legame con il ligando, il suo motivo ITIM viene fosforilato, reclutando le tirosina proteine fosfatasi PTPN6 e PTPN11 per attenuare i segnali di attivazione mediati da SYK, sopprimendo quindi le risposte delle cellule mieloidi tra cui la produzione di citochine e la degranulazione. Riferimenti correlati: PMID:14739280, PMID:16239426, PMID:34234773
• Agisce come recettore di riconoscimento di pattern per diversi ligandi: riconosce il DNA nelle trappole extracellulari dei neutrofili (NET), i cristalli di urato monosodico e molecole associate a patogeni come l'emozoina di plasmodio e l'acido micolico dei micobatteri, collegandolo al feedback antinfiammatorio e alla difesa dell'ospite. Riferimenti correlati: PMID:38367667, PMID:38386511, PMID:39143217, PMID:31269448, PMID:36542980
• Inibisce la citotossicità delle cellule natural killer (NK) e limita la maturazione delle cellule dendritiche in modo dipendente da IL-10, contribuendo all'omeostasi immunitaria. Riferimenti correlati: PMID:15238421, PMID:16239426
• Si localizza prevalentemente sulla membrana cellulare.
• È espresso preferenzialmente nei tessuti linfoidi e nelle cellule immunitarie innate/adattative, tra cui cellule NK, cellule T, cellule dendritiche, monociti e macrofagi; è rilevato a livello proteico nella polpa rossa splenica ricca di macrofagi e nei linfonodi. Riferimenti correlati: PMID:14739280, PMID:15238421, PMID:15548716, PMID:16239426, PMID:16838277
• Le modifiche post-traduzionali includono glicosilazione N-linker e fosforilazione; il dominio extracellulare contiene ponti disolfuro conservati essenziali per l'integrità strutturale.

Linee Guida Sperimentali e Consigli Tecnici

• L'immunogeno utilizzato corrisponde al dominio extracellulare (aa 65-265) di CLEC12A umano, che contiene il dominio della lectina di tipo C ed è sufficiente per generare anticorpi che riconoscono il recettore nativo su cellule vive.
• Questo coniugato è ottimizzato per citometria a flusso diretta (FC) senza anticorpo secondario; si consiglia di titolare l'anticorpo per determinare la concentrazione di lavoro ottimale per il tuo tipo di cellula e le condizioni di colorazione.
• Per la colorazione di superficie di CLEC12A, raccogli le cellule e lava con buffer FACS (PBS contenente 1–2% di FBS o BSA). Incubare con l'anticorpo coniugato con fluoroforo a 2–8°C per 20–30 minuti, al riparo dalla luce.
• Includi controlli di isotipo appropriati e reagenti di blocco del recettore Fc per minimizzare il legame non specifico, specialmente nelle popolazioni di cellule mieloidi.
• L'acquisizione dei dati deve essere eseguita il prima possibile dopo la colorazione; se è inevitabile un ritardo, fissa le cellule con paraformaldeide dopo il lavaggio e proteggile dalla luce.
• Evita cicli ripetuti di congelamento-scongelamento dell'anticorpo; conserva il coniugato non diluito a 2–8°C e proteggilo da esposizione prolungata alla luce.

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