Anticorpo monoclonale di coniglio anti-DC-SIGNR/CD299 umano per citometria a flusso - Q9H2X3

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di DC-SIGNR

• DC-SIGNR (CD299), codificato dal gene CLEC4M, è un recettore della lectina di tipo C transmembrana di tipo II. Lo splicing alternativo produce isoforme sia legate alla membrana sia secrete, con una proteina che svolge funzioni nella sorveglianza immunitaria e nel riconoscimento dei patogeni.
• Agisce come recettore di riconoscimento dei patogeni (PRR), in grado di legare i carboidrati ricchi di mannosio presenti sui patogeni, mediandone l'endocitosi e la successiva degradazione nei lisosomi. DC-SIGNR lega inoltre ICAM3 sulle cellule T, facilitando le interazioni immunitarie.
• Funziona come recettore di adesione per un'ampia gamma di virus, tra cui HIV-1, virus dell'epatite C (HCV), SARS-CoV, virus Ebola, virus dell'influenza, coronavirus umano 229E, citomegalovirus, virus del Nilo occidentale, virus dell'encefalite giapponese e virus Marburg, evidenziando il suo ruolo nella patogenesi virale.
• L'espressione tissutale è predominante nelle cellule endoteliali sinusoidali del fegato, nei linfonodi, nell'endotelio placentare, nelle cellule alveolari di tipo II e nelle cellule endoteliali polmonari. È importante notare che è assente nei macrofagi, distinguendosi dal suo omologo stretto DC-SIGN.
• Il dominio extracellulare (amminoacidi 71–399) contiene una regione a ripetizioni tandem e un dominio di riconoscimento dei carboidrati della lectina di tipo C (CRD), che lega i residui di mannosio in modo dipendente dal calcio, un processo fondamentale per l'interazione con i patogeni.
• Le modifiche post-traduzionali includono la glicosilazione legata all'N e la formazione di ponti disolfuro, essenziali per il corretto ripiegamento, la stabilità e l'attività di legame ai ligandi.
• A livello subcellulare, DC-SIGNR si localizza principalmente sulla membrana plasmatica, ma una forma solubile secreta generata dallo splicing alternativo è presente anche nei fluidi extracellulari.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno comprende l'intero dominio extracellulare (aa 71–399), garantendo che l'anticorpo riconosca la conformazione nativa e il dominio di riconoscimento dei carboidrati di DC-SIGNR. Ciò lo rende adatto al rilevamento sia delle forme legate alla membrana sia di quelle secrete.
• Per la citometria a flusso (FC), si consiglia di utilizzare cellule endoteliali sinusoidali del fegato umano o linee cellulari trasfettate con CLEC4M come controlli positivi. Includere un appropriato controllo isotipico e un blocco dei recettori Fc per ridurre al minimo il legame aspecifico.
• Il coniugato offre una fluorescenza intensa con un fotodecadimento minimo; titolare l'anticorpo per determinare la concentrazione ottimale per le proprie cellule e le impostazioni dello strumento. Eseguire un'adeguata compensazione se si utilizzano pannelli multicolore.
• Poiché DC-SIGNR può essere rilasciato, valutare la colorazione di superficie rispetto alla colorazione totale con permeabilizzazione, se necessario, per rilevare le frazioni intracellulari o secrete.

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