Anticorpo monoclonale coniglio anti-Desmogleina 3/PVA umana per citometria a flusso - P32926

Specifiche e parametri principali del prodotto

Background biologico: Funzione e localizzazione di Desmogleina-3

• Desmogleina-3 (DSG3), detta anche antigene del pemfigo volgare da 130 kDa (PVA) o membro della famiglia delle caderine 6 (CDHF6), è una glicoproteina transmembrana legante il calcio della superfamiglia delle caderine.
• DSG3 funziona come componente centrale dei desmosomi, essenziale per una forte adesione intercellulare, necessaria per l'attaccamento cellula-cellula mediato dai desmosomi nei cheratinociti e per l'ancoraggio dei bulbi piliferi in fase telogena nel follicolo. Riferimenti correlati: PMID:31835537 PMID:9701552
• Nei cheratinociti, la forza meccanica innesca l'assemblaggio dipendente da DSG3 delle giunzioni aderenti e dei desmosomi; DSG3 recluta anche YAP1 sulla membrana plasmatica tramite un complesso proteico contenente PKP1 e YWHAG, modulando potenzialmente la trascrizione e la proliferazione mediate da YAP1. Riferimenti correlati: PMID:31835537
• La pool citoplasmatica di DSG3 è fondamentale per localizzare CDH1 e CTNNB1 nelle giunzioni aderenti in via di sviluppo e per mantenere la stabilità delle componenti della placca DSP, JUP, PKP1, PKP2 e PKP3. Riferimenti correlati: PMID:22294297
• DSG3 regola positivamente la contrattilità cellulare e la formazione delle giunzioni organizzando i fasci di F-actina corticali e ancorando l'actina alle giunzioni strette tramite RAC1; inibisce inoltre la migrazione dei cheratinociti sopprimendo la segnalazione p38MAPK, modulando potenzialmente la guarigione delle ferite. Riferimenti correlati: PMID:22796473 PMID:26763450
• La proteina si localizza sulla membrana cellulare in corrispondenza dei desmosomi e delle giunzioni strette, con una pool citoplasmatica che svolge ruoli essenziali nel rimodellamento delle giunzioni.
• DSG3 è espressa prevalentemente negli epiteli stratificati — cute, mucosa orale ed esofagea e guaina esterna dei follicoli piliferi — dove mantiene l'integrità della barriera epiteliale.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• Questo anticorpo coniugato è progettato per la citometria a flusso e bersaglia un epitopo extracellulare (amminoacidi 50–615). Si consiglia di utilizzare cellule vive e non permeabilizzate per la colorazione di superficie.
• Effettuare la titolazione dell'anticorpo per determinare la concentrazione ottimale per il vostro tipo di campione, al fine di ottenere un buon rapporto segnale/rumore.
• Linee di cheratinociti umani (ad esempio HaCaT) o cellule epiteliali con espressione documentata di DSG3 sono controlli positivi adatti. Convalidare l'espressione nelle vostre cellule bersaglio utilizzando i dati trascrittomici o proteomici disponibili.
• Includere opportuni controlli di isotipo e controlli "fluorescence minus one" (FMO) per garantire una colorazione specifica.
• Dopo il ricevimento, conservare l'anticorpo a 2–8°C e proteggerlo dalla luce. Evitare cicli di congelamento-scongelamento per mantenere la stabilità del coniugato.

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