Anticorpo monoclonale coniugato da coniglio anti-DLL4 umano per citometria a flusso - Q9NR61

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della proteina simile a delta 4 (DLL4)

• DLL4, nota anche come Delta-like protein 4 o Delta4, è un ligando transmembrana per i recettori Notch che attiva NOTCH1 e NOTCH4, avviando la cascata di segnalazione Notch (PubMed:11134954). Riferimenti correlati: PMID:11134954
• Come regolatore chiave dell'angiogenesi, DLL4 controlla negativamente la proliferazione, la migrazione e la formazione di germogli angiogenici delle cellule endoteliali, garantendo una corretta organizzazione dei vasi sanguigni (PubMed:20616313). Riferimenti correlati: PMID:20616313
• Durante la neurogenesi del midollo spinale, DLL4 limita la specificazione degli interneuroni V2a, contribuendo alla diversità neuronale (PubMed:17728344). Riferimenti correlati: PMID:17728344
• Nella retina, DLL4 è necessaria per la proliferazione dei progenitori e la soppressione del destino di cellula fotorecettrice a bastoncino, facilitando la generazione di altri tipi di cellule retiniche.
• DLL4 è espressa prevalentemente sulla membrana cellulare delle cellule endoteliali vascolari, coerentemente con il suo ruolo nella segnalazione juxtacrina.
• La struttura proteica presenta più ripetizioni simili a EGF, un'elica transmembrana e una coda citoplasmatica, con glicosilazione e legami disolfuro che supportano la stabilità e le interazioni ligando-recettore.
• Le variazioni genetiche di DLL4 sono state associate a disturbi dello sviluppo, evidenziando il suo ruolo critico per la salute umana.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• Essendo un anticorpo coniugato , questo reagente è pronto per l'uso diretto in citometria a flusso senza necessità di colorazione con anticorpo secondario. Si consiglia di titolare l'anticorpo per determinare la concentrazione ottimale per il proprio modello cellulare.
• L'immunogeno copre il dominio extracellulare (amminoacidi 27–524), che contiene le regioni di interazione con Notch; ciò suggerisce che l'anticorpo riconosca probabilmente un epitopo funzionale. Validare sensibilità e specificità nel proprio sistema cellulare di interesse.
• Dato l'elevata espressione di DLL4 nell'endotelio vascolare, si consiglia di utilizzare linee cellulari endoteliali o cellule endoteliali primarie come controllo positivo. Come controlli negativi, includere cellule con espressione bassa o assente di DLL4.
• Per ottenere risultati affidabili in citometria a flusso, incorporare la discriminazione tra cellule vive e morte, controlli di isotipo e controlli di fluorescenza meno uno (FMO) per impostare porte di analisi accurate.
• Se il segnale è debole, verificare che l'antigene sia espresso correttamente sulla superficie cellulare; DLL4 può essere internalizzata dopo il legame con il ligando, quindi prestare attenzione alle condizioni di incubazione.

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