Rabbit anti-Human EGFR mAb for FC - P00533

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione del recettore del fattore di crescita epidermico

• EGFR è un recettore tirosin chinasi che si lega ai ligandi della famiglia EGF, innescando omo/eterodimerizzazione, autofosforilazione e attivazione di molteplici cascate a valle tra cui RAS-RAF-MEK-ERK, PI3K-AKT, PLCγ-PKC e moduli STAT; modula anche la segnalazione NF-κB e fosforila substrati come RGS16 e MUC1 per regolare la migrazione cellulare e altri processi. Riferimenti correlati: PMID:10805725 PMID:27153536 PMID:2790960 PMID:12297049 PMID:15611079 PMID:17909029 PMID:11116146 PMID:11602604 PMID:11483589 PMID:20462955
• EGFR funge da recettore per il virus dell'epatite C (HCV), facilitando l'ingresso virale negli epatociti promuovendo la formazione del complesso recettoriale CD81-CLDN1.
• L'isoforma 2 può agire come antagonista dell'azione dell'EGF, modulando potenzialmente la segnalazione dipendente dal ligando.
• A livello subcellulare, EGFR localizza sulla membrana cellulare, sulla membrana del reticolo endoplasmatico, sulla membrana dell'apparato di Golgi, sulla membrana nucleare, nell'endosoma e può essere secreto; piccoli pool sono trovati nel nucleo.
• EGFR è espresso ubiquitariamente nei tessuti, con l'isoforma 2 rilevata anche nei tumori ovarici.
• Le principali modificazioni post-traduzionali e caratteristiche includono fosforilazione, glicosilazione, ubiquitinazione e palmitoilazione, come evidenziato dalle parole chiave UniProt: interazione ospite-virus, proto-oncogene, tirosina proteina chinasi, recettore di membrana, transmembrana e segnalazione.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde al dominio extracellulare di legame del ligando (aa 335–525) dell'EGFR umano; l'anticorpo monoclonale di coniglio risultante probabilmente riconosce l'EGFR nativo di superficie cellulare. Per la citometria a flusso, eseguire la titolazione dell'anticorpo e includere controlli isotipici per ottimizzare le condizioni di colorazione.
• Questo coniugato è adatto per la colorazione di superficie di cellule vive; se è necessaria la rilevazione intracellulare, validare i protocolli appropriati di fissazione/permeabilizzazione per il tipo di cellule.
• Data l'ampia espressione tissutale dell'EGFR, confermare la specificità dell'anticorpo e il rapporto segnale/rumore nel campione biologico desiderato (es. linee cellulari tumorali, epatociti primari) nelle proprie condizioni sperimentali.
• Per gli studi sull'ingresso dell'HCV, considerare l'utilizzo dell'anticorpo per monitorare l'espressione dell'EGFR su linee derivate da epatociti (es. Huh7) e valutare il suo ruolo nella formazione del complesso CD81-CLDN1.

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