Rabbit anti-Human EGFR mAb per IF/ICC, FC - P00533

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione dell'EGFR

• EGFR (recettore del fattore di crescita epidermico) è un membro della famiglia di recettori tirosin chinasi ErbB ed è noto anche come ErbB1 o HER1.
• Si lega ai ligandi della famiglia EGF, inclusi EGF, TGF-alfa, anfiregulina (AREG), epigenina (EPGN), betacellulina (BTC), epiregulina (EREG) e fattore di crescita simile all'EGF legante l'eparina (HBEGF), portando alla omodimerizzazione o eterodimerizzazione del recettore e all'autofosforilazione su residui citoplasmatici chiave. (PubMed:10805725, PubMed:12297049, PubMed:15611079, PubMed:17909029) Riferimenti correlati: PMID:10805725, PMID:12297049, PMID:15611079, PMID:17909029
• Il recettore fosforilato recluta proteine adattatrici come GRB2, avviando diverse cascate di segnalazione a valle, inclusi i moduli RAS-RAF-MEK-ERK, PI3 chinasi-AKT, PLCgamma-PKC e STATs. Può anche attivare la via di segnalazione NF-kappa-B. (PubMed:27153536, PubMed:11116146) Riferimenti correlati: PMID:27153536, PMID:11116146
• L'EGFR fosforila direttamente altre proteine come RGS16 (attivando la sua attività GTPasica), MUC1 (migliorando la sua interazione con SRC e CTNNB1/beta-catenina) e CCDC88A/GIV (promuovendo la migrazione cellulare trattenendo l'EGFR alla membrana cellulare). (PubMed:11602604, PubMed:11483589, PubMed:20462955) Riferimenti correlati: PMID:11602604, PMID:11483589, PMID:20462955
• L'isoforma 2 dell'EGFR può funzionare come antagonista dell'azione dell'EGF.
• L'EGFR si localizza in più compartimenti cellulari, inclusi la membrana cellulare, la membrana del reticolo endoplasmatico, la membrana dell'apparato di Golgi, la membrana nucleare, gli endosomi e il nucleo; può anche essere secreto.
• È espresso ubiquitariamente, con l'isoforma 2 rilevata anche nei tumori ovarici.
• Negli epatociti, l'EGFR agisce come recettore per il virus dell'epatite C (HCV), facilitando l'ingresso virale promuovendo la formazione del complesso recettoriale CD81-CLDN1 e migliorando la fusione della membrana.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• Questo anticorpo mira a un epitopo del dominio extracellulare (amminoacidi 335-525), rendendolo adatto per il rilevamento dell'EGFR di superficie cellulare in applicazioni su cellule vive e fissate come la citometria a flusso e l'immunofluorescenza.
• Per la citometria a flusso, si consiglia di titolare l'anticorpo per determinare la concentrazione ottimale e includere appropriati controlli isotipici per garantire la specificità.
• Per l'immunofluorescenza, può essere utilizzata una fissazione delicata con paraformaldeide seguita da permeabilizzazione con Triton X-100 o metanolo; tuttavia, il rilevamento dell'EGFR di superficie potrebbe non richiedere la permeabilizzazione.
• Poiché la reattività crociata è stata convalidata solo per l'EGFR umano, gli utenti devono verificare la reattività in altre specie o tipi di campioni di interesse.
• Come per qualsiasi anticorpo ricombinante, eseguire controlli di coerenza da lotto a lotto e convalidare nel sistema di saggio previsto.

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